{"id":3272,"date":"2023-01-13T11:48:44","date_gmt":"2023-01-13T17:48:44","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3272"},"modified":"2023-01-20T13:08:13","modified_gmt":"2023-01-20T19:08:13","slug":"cfse-5-and-6-carboxyfluorescein-diacetate-succinimidyl-ester","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/cfse-5-and-6-carboxyfluorescein-diacetate-succinimidyl-ester\/","title":{"rendered":"CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester]"},"content":{"rendered":"\n

Se reconoce ampliamente que el marcaje fluorescente de las c\u00e9lulas es un medio eficaz para determinar el n\u00famero total de c\u00e9lulas o cu\u00e1ntas c\u00e9lulas viables existen en una muestra. La citometr\u00eda de flujo combinada con tinci\u00f3n fluorescente es una poderosa herramienta para analizar poblaciones de c\u00e9lulas heterog\u00e9neas. <\/p>\n\n\n\n

El diacetato de fluoresce\u00edna (FDA) y sus derivados son mol\u00e9culas no fluorescentes que se difunden en las c\u00e9lulas y son hidrolizadas por esterasas intracelulares no espec\u00edficas para dar productos fluorescentes. Los productos fluorescentes pueden acumularse solo en aquellas c\u00e9lulas que tienen membranas celulares intactas; por lo tanto, las c\u00e9lulas muertas con membranas con fugas no se ti\u00f1en. La cin\u00e9tica precisa del transporte de membrana y la hidr\u00f3lisis intracelular de FDA y sus an\u00e1logos (como CDCFDA) est\u00e1n relacionadas con las funciones celulares, por lo que el etiquetado de FDA se puede usar para monitorear c\u00e9lulas mediante citometr\u00eda de flujo o microscop\u00eda de fluorescencia. La intensidad de la fluorescencia de las c\u00e9lulas marcadas con colorantes FDA var\u00eda considerablemente entre las l\u00edneas celulares y las cepas, probablemente debido a las diferencias en la actividad de la esterasa intracelular. CFSE es un derivado de FDA reactivo con amina que se usa ampliamente para monitorear la proliferaci\u00f3n celular con un cit\u00f3metro de flujo.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-22022<\/td>CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester]<\/td>25 mg<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n
\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante, Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). Almacenamiento: Congelar  (< -15 \u00b0C), Minimizar la exposici\u00f3n a la luz<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Propiedades f\u00edsicas<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Peso Molecular <\/td>557.46<\/td><\/tr>
Disolvente<\/td>DMSO<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Espectro<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades Espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>498<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>517<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Calculadora<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Preparaci\u00f3n de la soluci\u00f3n de stock com\u00fan<\/mark>
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa espec\u00edfica de CFSE [5-(y 6)-carboxifluoresce\u00edna diacetato, succinimidil \u00e9ster] (CAS 150347-59-4<\/em>) a la concentraci\u00f3n dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la soluci\u00f3n madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales\/fisiol\u00f3gicos apropiados.<\/p>\n\n\n\n

<\/td>0.1 mg<\/strong><\/td>0.5 mg<\/strong><\/td>1 mg<\/strong><\/td>5 mg<\/strong><\/td>10 mg<\/strong><\/td><\/tr>
1 mM<\/strong><\/td>179.385 \u00b5L<\/td>896.925 \u00b5L<\/td>1.794 mL<\/td>8.969 mL<\/td>17.939 mL<\/td><\/tr>
5 mM<\/strong><\/td>35.877 \u00b5L<\/td>179.385 \u00b5L<\/td>358.77 \u00b5L<\/td>1.794 mL<\/td>3.588 mL<\/td><\/tr>
10 mM<\/strong><\/td>17.939 \u00b5L<\/td>89.693 \u00b5L<\/td>179.385 \u00b5L<\/td>896.925 \u00b5L<\/td>1.794 mL<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
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FIg. 1<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Figura 1.<\/strong> Interacciones entre treponema pallidum y plaquetas. (A) La citometr\u00eda de flujo a\u00edsla las poblaciones co-localizadas de plaquetas y treponemas mediante selecci\u00f3n SSC y FSC. Los diagramas de puntos de (B) treponemas tratados con calor marcados con CFSE demuestran una uni\u00f3n reducida a plaquetas humanas marcadas con PE\/Cy5 anti-CD41a en comparaci\u00f3n con (C) treponemas viables marcados con CSFE. (D) Los treponemas viables marcados con CFSE se unieron significativamente a m\u00e1s plaquetas humanas (media = 55,13 % \u00b1 2,91 [DE] * P <0,0001) en comparaci\u00f3n con los treponemas tratados t\u00e9rmicamente (media = 19,05 % \u00b1 2,29 [DE]) despu\u00e9s de la coincubaci\u00f3n durante 16 horas a 37\u00b0C y ~ 5% de ox\u00edgeno. Los resultados representan la media de tres experimentos independientes con significancia estad\u00edstica calculada por ANOVA de dos v\u00edas, con un m\u00ednimo de 3 r\u00e9plicas por tipo de muestra por experimento. (E) Los recuentos de FOV con microscop\u00eda de campo oscuro (20 ubicaciones aleatorias\/portaobjetos) demuestran que los treponemas viables se unen significativamente a m\u00e1s plaquetas humanas (media = 31,73 % \u00b1 1,19 [SD] *P<0,0001) que los treponemas tratados t\u00e9rmicamente (media = 6,47 % \u00b1 1,19 [ SD]) despu\u00e9s de la coincubaci\u00f3n con ox\u00edgeno al 5 % a 34 \u00b0C durante 48 horas. Los resultados representan la media de tres experimentos independientes con significaci\u00f3n estad\u00edstica calculada mediante la prueba t de Student de dos colas no pareadas, n = 3. (F) Los treponemas tratados t\u00e9rmicamente (arriba) no son m\u00f3viles pero son morfol\u00f3gicamente similares a los treponemas viables (abajo). (G) La microscop\u00eda de campo oscuro con un aumento de 1000x demuestra que las interacciones plaquetarias son reversibles. La captura de im\u00e1genes de micrograf\u00edas de video muestra la uni\u00f3n de borde de un treponema a una plaqueta activada (0,01 s a 8,10 s) que luego se separa y se aleja (9,05 s). Fuente: Interacci\u00f3n de Treponema pallidum, la espiroqueta de la s\u00edfilis, con plaquetas humanas por Church et al., PLOS, enero de 2019.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
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Fig. 2<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Figura 2<\/strong>. Efectos de GTM (concentraciones s\u00e9ricas de 1, 1\/2 y 1\/4 veces) y probenecid (Prob, 80\u2009\u03bcM) sobre la acumulaci\u00f3n intracelular de 6-CF en c\u00e9lulas CHO-hOAT1 (izquierda) y 5-CF en HEK293-hOAT3 celdas.(derecha). Los efectos de GTM en la actividad de captaci\u00f3n de hOAT1 y hOAT3 se muestran en la Fig. 6. GTM a concentraciones s\u00e9ricas de 1\/4, 1\/2 y 1 vez redujo significativamente la acumulaci\u00f3n intracelular de 6-CF, un sustrato de OAT1. en un 43,9, 41,9 y 58,1 %, respectivamente, en comparaci\u00f3n con la muestra de suero en blanco a las concentraciones correspondientes. Asimismo, GTM a 1\/2 y 1 vez de concentraci\u00f3n s\u00e9rica redujo significativamente la acumulaci\u00f3n intracelular de 5-CF, un sustrato de OAT3, en un 36,4 % y 31,3 %, respectivamente, en comparaci\u00f3n con la muestra de suero en blanco a la concentraci\u00f3n correspondiente. Como inhibidores de control positivo de hOAT1 y hOAT3, el probenecid (80\u2009\u03bcM) redujo significativamente la acumulaci\u00f3n intracelular de 6-CF y 5-CF en un 50,4 y un 50,7 %, respectivamente. Estos estudios in vitro indicaron que GTM inhibi\u00f3 significativamente el transporte de captaci\u00f3n mediado por hOAT1 y hOAT3. *P\u2009<\u20090.05, **P\u2009<\u20090.01 y ***P\u2009<\u20090.001. Fuente: El t\u00e9 verde inhibi\u00f3 la eliminaci\u00f3n de toxinas nefro-cardiovasculares y deterior\u00f3 la funci\u00f3n renal en ratas con insuficiencia renal por Peng et al., Scientific Reports, noviembre de 2015.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
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Fig 3.<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Figura 3.<\/strong> Estructura quimica para CFSE [5-(and 6)-Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester] *CAS 150347-59-4*<\/p>\n\n\n\n

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Bibliograf\u00eda<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Interaction of Treponema pallidum, the syphilis spirochete, with human platelets<\/a>
Authors: <\/strong>Church, Brigette and Wall, Erika and Webb, John R and Cameron, Caroline E
Journal: <\/strong>PloS one (2019): e0210902<\/p>\n\n\n\n

Antigen presentation of the Oct4 and Sox2 peptides by CD154-activated B lymphocytes enhances the killing effect of cytotoxic T lymphocytes on tumor stem-like cells derived from cisplatin-resistant lung cancer cells<\/a>
Authors: <\/strong>Zhang, Xueyan and Zhang, Yanwei and Xu, Jianlin and Wang, Huimin and Zheng, Xiaoxuan and Lou, Yuqing and Han, Baohui
Journal: <\/strong>Journal of Cancer (2018): 367<\/p>\n\n\n\n

Fluid and cell behaviors along a 3D printed alginate\/gelatin\/fibrin channel<\/a>
Authors: <\/strong>Xu, Yufan and Wang, Xiaohong
Journal: <\/strong>Biotechnology and bioengineering (2015): 1683–1695<\/p>\n\n\n\n

Overexpression of the CaTIP1-1 pepper gene in tobacco enhances resistance to osmotic stresses<\/a>
Authors: <\/strong>Yin, Yan-Xu and Wang, Shu-Bin and Xiao, Huai-Juan and Zhang, Huai-Xia and Zhang, Zhen and Jing, Hua and Zhang, Ying-Li and Chen, Ru-Gang and Gong, Zhen-Hui
Journal: <\/strong>International journal of molecular sciences (2014): 20101–20116<\/p>\n\n\n\n

Identification of VAR2CSA domain-specific inhibitory antibodies of the Plasmodium falciparum erythrocyte membrane protein 1 using a novel flow cytometry assay<\/a>
Authors: <\/strong>Obiakor, Harold and Avril, Marion and MacDonald, Nicholas J and Srinivasan, Prakash and Reiter, Karine and Anderson, Charles and Holmes, Kevin L and Fried, Michal and Duffy, Patrick E and Smith, Joseph D and others, undefined
Journal: <\/strong>Clinical and Vaccine Immunology (2013): 433–442<\/p>\n\n\n\n

Aging enhances maceration-induced ultrastructural alteration of the epidermis and impairment of skin barrier function<\/a>
Authors: <\/strong>Minematsu, Takeo and Yamamoto, Yuko and Nagase, Takashi and Naito, Ayumi and Takehara, Kimie and Iizaka, Shinji and Komagata, Kazunori and Huang, Lijuan and Nakagami, Gojiro and Akase, Tomoko and others, undefined
Journal: <\/strong>Journal of dermatological science (2011): 160–168<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Ver todas las\u00a068 referencias:\u00a0<\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

Novel method for cell debris removal in the flow cytometric cell cycle analysis using carboxy-fluorescein diacetate succinimidyl ester
Authors: <\/strong>Terho P, Lassila O.
Journal: <\/strong>Cytometry A (2006): 552<\/p>\n\n\n\n

Modification of the fluorescein diacetate assay for screening of antifungal agents against Candida albicans: comparison with the NCCLS methods
Authors: <\/strong>Brouwer N, Kohen J, Jamie J, Vemulpad S.
Journal: <\/strong>J Microbiol Methods (2006): 234<\/p>\n\n\n\n

Optimisation of the fluorescein diacetate antibacterial assay
Authors: <\/strong>Wan, undefined and y S, Brouwer N, Liu Q, Mahon A, Cork S, Karuso P, Vemulpad S, Jamie J.
Journal: <\/strong>J Microbiol Methods (2005): 21<\/p>\n\n\n\n

A three-dimensional flow control concept for single-cell experiments on a microchip. 2. Fluorescein diacetate metabolism and calcium mobilization in a single yeast cell as stimulated by glucose and pH changes
Authors: <\/strong>Peng XY, Li PC.
Journal: <\/strong>Anal Chem (2004): 5282<\/p>\n\n\n\n

Effect of immunosuppressants on T-cell subsets observed in vivo using carboxy-fluorescein diacetate succinimidyl ester labeling
Authors: <\/strong>Hu H, Dong Y, Feng P, Fechner J, Hamawy M, Knechtle SJ.
Journal: <\/strong>Transplantation (2003): 1075<\/p>\n\n\n\n

Carboxy-fluorescein diacetate, succinimidyl ester labeled papillomavirus virus-like particles fluoresce after internalization and interact with heparan sulfate for binding and entry
Authors: <\/strong>Drobni P, Mistry N, McMillan N, Ev and er M., undefined
Journal: <\/strong>Virology (2003): 163<\/p>\n\n\n\n

Detection of Saccharomyces cerevisiae carboxylesterase activity after native and sodium dodecyl sulfate electrophoresis by using fluorescein diacetate as substrate
Authors: <\/strong>Lomolino G, Lante A, Crapisi A, Spettoli P, Curioni A.
Journal: <\/strong>Electrophoresis (2001): 1021<\/p>\n\n\n\n

Fluorescein diacetate hydrolysis as a measure of fungal biomass in soil
Authors: <\/strong>Gaspar ML, Cabello MN, Pollero R, Aon MA.
Journal: <\/strong>Curr Microbiol (2001): 339<\/p>\n\n\n\n

Extrusion of fluorescein diacetate by multidrug-resistant Candida albicans
Authors: <\/strong>Yang HC, Mikami Y, Imai T, Taguchi H, Nishimura K, Miyaji M, Branchini ML.
Journal: <\/strong>Mycoses (2001): 368<\/p>\n\n\n\n

Potential problems with fluorescein diacetate assays of cell viability when testing natural products for antimicrobial activity
Authors: <\/strong>Clarke JM, Gillings MR, Altavilla N, Beattie AJ.
Journal: <\/strong>J Microbiol Methods (2001): 261<\/p>\n\n\n\n

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<\/div>\n\n\n\n

Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Relative Brightness of Fluorescent Dyes<\/a><\/p>\n\n\n\n

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