{"id":3217,"date":"2023-01-11T12:31:37","date_gmt":"2023-01-11T18:31:37","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3217"},"modified":"2023-01-20T13:44:08","modified_gmt":"2023-01-20T19:44:08","slug":"amplite-rapid-fluorimetric-glutathione-gsh-gssg-ratio-assay-kit-green-fluorescence","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-rapid-fluorimetric-glutathione-gsh-gssg-ratio-assay-kit-green-fluorescence\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Rapid Fluorimetric Glutathione GSH\/GSSG Ratio Assay Kit *Green Fluorescence*"},"content":{"rendered":"\n

Cuando las c\u00e9lulas se exponen a mayores niveles de estr\u00e9s oxidativo, el GSSG se acumular\u00e1 y la proporci\u00f3n de GSH a GSSG disminuir\u00e1. el glutati\u00f3n redutasa recicla GSSG a GSH con oxidaci\u00f3n simult\u00e1nea de b-nicotinamida adenina dinucle\u00f3tido fosfato. El seguimiento de la relaci\u00f3n GSH\/GSSG y la cuantificaci\u00f3n de GSSG en muestras biol\u00f3gicas son esenciales para evaluar el estado redox y de desintoxicaci\u00f3n de c\u00e9lulas y tejidos en relaci\u00f3n con el papel protector del glutati\u00f3n frente a la lesi\u00f3n celular oxidativa y mediada por radicales libres. Hay algunos reactivos o kits de ensayo disponibles para la cuantificaci\u00f3n de tioles en sistemas biol\u00f3gicos. Sin embargo, todos los kits comerciales carecen de sensibilidad o tienen protocolos tediosos. <\/p>\n\n\n\n

Nuestro kit proporciona un ensayo ultrasensible para cuantificar el GSH en la muestra. El kit utiliza un tinte no fluorescente soluble en agua patentado que se vuelve fuertemente fluorescente al reaccionar con el tiol. El kit proporciona un m\u00e9todo fluorom\u00e9trico sensible de un solo paso para detectar tan solo 1 picomol de ciste\u00edna o GSH en un volumen de ensayo de 100 \u00b5L. El ensayo se puede realizar en un conveniente formato de placa de microtitulaci\u00f3n de 96 pozos o de 384 pozos y se puede adaptar f\u00e1cilmente a la automatizaci\u00f3n sin un paso de separaci\u00f3n. Su se\u00f1al se puede leer f\u00e1cilmente con un lector de microplacas de fluorescencia.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-10060<\/td>Amplite\u00ae Rapid Fluorimetric Glutathione GSH\/GSSG Ratio Assay Kit *Green Fluorescence*<\/td>200 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n
\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Fluorescencia<\/mark> <\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>490 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>525 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>515 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Negra s\u00f3lida <\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Thiolite\u2122 Green 520WS<\/td>1 vial <\/td><\/tr>
Componente B: Buffer de ensayo <\/td>1 botella (25 mL)<\/td><\/tr>
Componente C: Estandar GSH<\/td>1 vial (62 \u00b5g)<\/td><\/tr>
Componente D: GSSG Probe<\/td>1 botella (polvo liofilizado)<\/td><\/tr>
Componente E: GSSG Standard<\/td>1 vial (124 \u00b5g)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n.<\/em><\/p>\n\n\n\n

1. Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH (1 mM)<\/em><\/p>\n\n\n\n

Agregue 200 \u00b5l de buffer de ensayo (componente B) en el vial de est\u00e1ndar de GSH (componente C) para preparar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 1 mM (1 nmol\/\u00b5l).<\/p>\n\n\n\n

2. Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG (1 mM)<\/em><\/p>\n\n\n\n

Agregue 200 \u00b5L de ddH2<\/sub>O en el vial de GSSG Standard (Componente E) para preparar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG de 1 mM (1 nmol\/\u00b5L).<\/p>\n\n\n\n

3. Soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 520WS (100X)<\/em><\/p>\n\n\n\n

Agregue 100 \u00b5L de ddH2<\/sub>O en el vial de Thiolite\u2122 Green 520WS (Componente A) para preparar una soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 520WS 100X. Nota: Evite la luz.<\/p>\n\n\n\n

\n\n\n\n

PREPARACION DE SOLUCION DE ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

Para su conveniencia puede usar el Planificador de diluci\u00f3n en serie: https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/10060<\/a><\/p>\n\n\n\n


Est\u00e1ndar GSH o GSSG<\/p>\n\n\n\n

Est\u00e1ndares de GSH diluidos en serie preparados (0 a 10 \u00b5M): agregue 10 \u00b5L de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 1 mM (1 nmol\/\u00b5L) a 990 \u00b5L de buffer de ensayo (componente B) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 10 \u00b5M (10 pmol\/\u00b5L) (GSH7). Tome 10 \u00b5M (10 pmol\/\u00b5L) de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH (GSH7) y realice diluciones en serie 1:2 en buffer de ensayo (componente B) para obtener est\u00e1ndares de GSH diluidos en serie (GSH6 – GSH1). Nota: La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH diluida es inestable. \u00daselo dentro de las 4 horas. Prepare est\u00e1ndares de GSSG diluidos en serie (0 a 5 \u00b5M): agregue 10 \u00b5L de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG de 1 mM (1 nmol\/\u00b5L) a 990 \u00b5L de buffer de ensayo (componente B) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG de 10 \u00b5M (10 pmol\/\u00b5L) . Tome una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG de 10 \u00b5M (10 pmol\/\u00b5L) y realice diluciones en serie 1:2 en buffer de ensayo (componente B) para obtener est\u00e1ndares de GSSG diluidos en serie (GSSG7 – GSSG1). Nota: La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSSG diluida es inestable. \u00daselo dentro de las primeras 4 horas.<\/p>\n\n\n\n

\n\n\n\n

PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n de trabajo GSH (GSH-WS)<\/em><\/li><\/ol>\n\n\n\n

    Agregue 100 \u00b5L de soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 520WS 100X en 10 mL de buffer de ensayo (Componente B) y mezcle bien mediante agitaci\u00f3n vorticial.
    Nota: Esta soluci\u00f3n de trabajo de GSH (GSH-WS) es suficiente para dos placas de 96 pocillos. Es estable a 4 \u00b0C durante al menos 4 horas protegido de la luz.<\/p>\n\n\n\n

    1. Soluci\u00f3n de trabajo de GSH total (TGSH-WS)<\/em> .
      Agregue 5 mL de GSH-WS en la botella de GSSG Probe (Componente D) y m\u00e9zclelos bien. Nota: Esta soluci\u00f3n de trabajo de GSH total (TGSH-WS) es suficiente para una placa de 96 pocillos. Es inestable a temperatura ambiente y se debe usar de inmediato dentro de las primeras 2 horas.
      Nota: Evite la exposici\u00f3n a la luz.
      Nota: Como alternativa, se puede hacer una sonda GSSG 25X agregando 200 \u00b5L de ddH2O en la botella de la sonda GSSG (componente D) y luego preparar el TSGS-WS mezclando la soluci\u00f3n madre con GSH-WS proporcionalmente.<\/li><\/ol>\n\n\n\n

      <\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

      <\/div>\n\n\n\n

      Imagen<\/mark><\/p>\n\n\n\n

      \"\"<\/figure>\n\n\n\n

      Figura 1<\/strong>. Las respuestas a la dosis de GSH y GSSG se midieron con el kit de ensayo de relaci\u00f3n de glutati\u00f3n GSH\/GSSG fluorim\u00e9trico r\u00e1pido Amplite\u00ae. Azul: respuestas a la dosis de GSH (0,078 a 5 \u00b5M); Rojo: respuesta a la dosis de GSSG (0,078 a 5 \u00b5M GSSG que equivale a 0,156 a 10 \u00b5M GSH).<\/p>\n\n\n\n

      <\/div>\n\n\n\n

      Bibliograf\u00eda<\/mark><\/p>\n\n\n\n

      An arylthiazyne derivative is a potent inhibitor of lipid peroxidation and ferroptosis providing neuroprotection in vitro and in vivo<\/a>
      Authors: <\/strong>Keuters, Meike Hedwig and Keksa-Goldsteine, Velta and Dhungana, Hiramani and Huuskonen, Mikko T and Pomeshchik, Yuriy and Savchenko, Ekaterina and Korhonen, Paula K and Singh, Yajuvinder and Wojciechowski, Sara and Lehtonen, {\\v{S}}{\\’a}rka and others,
      Journal: <\/strong>Scientific reports (2021): 1–14<\/p>\n\n\n\n

      Notoginsenoside R1 attenuates high glucose-induced endothelial damage in rat retinal capillary endothelial cells by modulating the intracellular redox state<\/a>
      Authors: <\/strong>Fan, Chunlan and Qiao, Yuan and Tang, Minke
      Journal: <\/strong>Drug design, development and therapy (2017): 3343<\/p>\n\n\n\n

      ROS production and glutathione response in keratinocytes after application of \u03b2-carotene and VIS\/NIR irradiation<\/a>
      Authors: <\/strong>Lohan, Silke B and Vitt, Kristina and Scholz, Patrik and Keck, Cornelia M and Meinke, Martina C
      Journal: <\/strong>Chemico-biological interactions (2017)<\/p>\n\n\n\n

      Osmotic stress is accompanied by protein glycation in Arabidopsis thaliana<\/a>
      Authors: <\/strong>Paudel, Gagan and Bilova, Tatiana and Schmidt, Rico and Greifenhagen, Uta and Berger, Robert and Tarakhovskaya, Elena and St\u00f6ckhardt, Stefanie and Balcke, Gerd Ulrich and Humbeck, Klaus and Br, undefined and t, Wolfgang and others, undefined
      Journal: <\/strong>Journal of Experimental Botany (2016): 6283–6295<\/p>\n\n\n\n

      Interaction of silver nanoparticles with human and porcine skin
      Authors: <\/strong>Ahlberg, Sebastian
      Journal: <\/strong>(2016)<\/p>\n\n\n\n

      Systemic Induction of NO-, Redox-, and cGMP Signaling in the Pumpkin Extrafascicular Phloem upon Local Leaf Wounding<\/a>
      Authors: <\/strong>Gaupels, Frank and Furch, Alex and ra CU , undefined and Zimmermann, Matthias R and Chen, Faxing and Kaever, Volkhard and Buhtz, Anja and Kehr, Julia and Sarioglu, Hakan and Kogel, Karl-Heinz and Durner, J\u00f6rg
      Journal: <\/strong>Frontiers in plant science (2016)<\/p>\n\n\n\n

      Targeting mitochondria with avocatin B induces selective leukemia cell death<\/a>
      Authors: <\/strong>Lee, Eric A and Angka, Leonard and Rota, Sarah-Grace and Hanlon, Thomas and Mitchell, Andrew and Hurren, Rose and Wang, Xiao Ming and Gronda, Marcela and Boyaci, Ezel and Bojko, Barbara and others,
      Journal: <\/strong>Cancer research (2015): 2478–2488<\/p>\n\n\n\n

      Prediction of intracellular metabolic states from extracellular metabolomic data<\/a>
      Authors: <\/strong>Aurich, Maike K and Paglia, Giuseppe and Rolfsson, Ottar and Hrafnsd\u00f3ttir, Sigr\u00fan and Magn\u00fasd\u00f3ttir, Manuela and Stefaniak, Magdalena M and Palsson, Bernhard O and Fleming, Ronan MT and Thiele, Ines
      Journal: <\/strong>Metabolomics (2015): 603–619<\/p>\n\n\n\n

      Molecular mechanisms of hyperthermia-induced apoptosis enhanced by withaferin A<\/a>
      Authors: <\/strong>Cui, Zheng-Guo and Piao, Jin-Lan and Rehman, Mati UR and Ogawa, Ryohei and Li, Peng and Zhao, Qing-Li and Kondo, Takashi and Inadera, Hidekuni
      Journal: <\/strong>European journal of pharmacology (2014): 99–107<\/p>\n\n\n\n

      Cancer & Metabolism<\/a>
      Authors: <\/strong>LaMonte, Gregory and Tang, Xiaohu and Chen, Julia Ling-Yu and Wu, Jianli and Ding, Chien-Kuang Cornelia and Keenan, Melissa M and Sangokoya, Carolyn and Kung, Hsiu-Ni and Ilkayeva, Olga and Boros, L\u00e1szl\u00f3 G and others, undefined
      Journal: <\/strong>(2013)<\/p>\n\n\n\n

      <\/div>\n\n\n\n

      Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

      A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
      Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
      Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a>
      An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults<\/a>
      Attenuation of lysyl oxidase and collagen gene expression in keratoconus patient corneal epithelium corresponds to disease severity<\/a><\/p>\n\n\n\n

      <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

      Kit de ensayo r\u00e1pido para la diferencia glutati\u00f3n GSH\/GSSG fuorom\u00e9trica Amplite\u00ae, Nuestro kit proporciona un ensayo ultrasensible para cuantificar el GSH en la muestra y utiliza un tinte no fluorescente soluble en agua patentado que se vuelve fuertemente fluorescente al reaccionar con el tiol.<\/p>\n","protected":false},"featured_media":3218,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3217"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":4,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3217\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3729,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3217\/revisions\/3729"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3218"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3217"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3217"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}