{"id":3164,"date":"2023-01-09T16:41:12","date_gmt":"2023-01-09T22:41:12","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3164"},"modified":"2023-01-20T14:22:12","modified_gmt":"2023-01-20T20:22:12","slug":"amplite-fluorimetric-lysyl-oxidase-assay-kit-red-fluorescence-2","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-fluorimetric-lysyl-oxidase-assay-kit-red-fluorescence-2\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*"},"content":{"rendered":"\n

La lisil oxidasa (LOX) es una enzima extracelular que cataliza la formaci\u00f3n de aldeh\u00eddos a partir de residuos de lisina en precursores de col\u00e1geno y elastina. Estos aldeh\u00eddos son altamente reactivos y experimentan reacciones qu\u00edmicas espont\u00e1neas con otros residuos de aldeh\u00eddos derivados de la lisil oxidasa o con residuos de lisina sin modificar. Esto da como resultado el entrecruzamiento del col\u00e1geno y la elastina, lo cual es esencial para la estabilizaci\u00f3n de las fibrillas de col\u00e1geno y para la integridad y elasticidad de la elastina madura. La lisil oxidasa se ha identificado como un posible supresor de tumores. La actividad de la lisil oxidasa en muestras biol\u00f3gicas se eval\u00faa tradicionalmente y de forma m\u00e1s fiable mediante ensayos de punto final de liberaci\u00f3n de tritio utilizando sustratos de elastina o col\u00e1geno radiomarcados que implican una laboriosa destilaci\u00f3n al vac\u00edo del agua tritiada liberada. <\/p>\n\n\n\n

Este kit ofrece un ensayo fluorescente sensible para medir la actividad de LOX utilizando nuestro sustrato LOX patentado que libera per\u00f3xido de hidr\u00f3geno tras la oxidaci\u00f3n de LOX. La cantidad de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno liberado por la oxidaci\u00f3n de LOX se detecta utilizando nuestro sustrato Amplite\u00ae HRP en las reacciones acopladas a HRP. Este m\u00e9todo permite la detecci\u00f3n de lisil oxidasa por debajo de ng\/mL y es mucho m\u00e1s sensible que el ensayo fluorom\u00e9trico actualmente disponible para esta actividad enzim\u00e1tica. Este m\u00e9todo elimina la interferencia que se produce en algunas muestras biol\u00f3gicas y se puede utilizar f\u00e1cilmente para detectar la actividad de la lisil oxidasa en experimentos de cultivos celulares. <\/p>\n\n\n\n

Tenga en cuenta que el kit no incluye la enzima lisil oxidasa.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-15255<\/td>Amplite\u00ae Fluorimetric Lysyl Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/td>500 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n
\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Fluorescencia<\/mark> <\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>540 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>590 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>570 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Pared negra <\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Amplite\u2122 HRP Substrate (sensible a la luz)<\/td>1 vial <\/td><\/tr>
Componente B: Buffer de ensayo <\/td>1 botella (50 mL)<\/td><\/tr>
Componente C: Horseradish Peroxidase<\/td>1 vial (50 unidades)<\/td><\/tr>
Componente D: DMSO <\/td>1 vial (200 \u00b5L)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Espectro <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades Espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>571<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>584<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n.<\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n madre de sustrato Amplite\u2122 HRP (250X)<\/em>
    Agregue 100 \u00b5l de DMSO (componente D) en el vial de sustrato Amplite\u2122 HRP (componente A).
    Nota El sustrato Amplite\u2122 HRP es inestable en presencia de tioles como DTT, glutati\u00f3n (forma reducida: GSH) y \u03b2-mercaptoetanol. La presencia de tioles a una concentraci\u00f3n superior a 10 \u00b5M disminuir\u00e1 significativamente el rango din\u00e1mico del ensayo. Algunos detergentes (como Brij-35, Tween-20 y NP40), NADH y NADPH tambi\u00e9n pueden interferir con este ensayo.<\/li>
  2. Soluci\u00f3n madre de peroxidasa de r\u00e1bano picante (50 U\/mL)<\/em>
    Agregue 1 ml de tamp\u00f3n de ensayo (componente B) al vial de peroxidasa de r\u00e1bano picante (componente C).<\/li><\/ol>\n\n\n\n
    \n\n\n\n

    PREPARACION DE SOLUCION DE ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

    Para su conveniencia puede usar el Planificador de diluci\u00f3n en serie:
    https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/15255<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Est\u00e1ndar de lisil oxidasa<\/em>
    Prepare est\u00e1ndares de lisil oxidasa por diluci\u00f3n en serie para obtener est\u00e1ndares de 0,04 a 4 \u00b5g\/mL (LS1 – LS7). Nota: El est\u00e1ndar de lisil oxidasa no se incluye en este kit. Se puede comprar en R&D Sytems (2639-AO-010 o 6069-AO-010).<\/p>\n\n\n\n

    \n\n\n\n

    PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

    Soluci\u00f3n de trabajo de sustrato Amplite\u2122 HRP<\/em>
    Agregue 20 \u03bcL de soluci\u00f3n madre de sustrato Amplite\u2122 HRP (250X) y 20 \u03bcL de peroxidasa de r\u00e1bano picante (50 U\/mL) en 5 mL de buffer de ensayo (componente B) para obtener un volumen total de 5.04 mL.
    Nota<\/strong>: La soluci\u00f3n de trabajo no es estable, util\u00edcela inmediatamente y evite la exposici\u00f3n directa a la luz.<\/p>\n\n\n\n

    <\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    \"\"
    Fig. 1<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1<\/strong>. La respuesta a la dosis de lisil oxidasa se midi\u00f3 con el kit de ensayo fluorom\u00e9trico de lisil oxidasa Amplite\u00ae en una placa negra s\u00f3lida de 96 pozos utilizando un lector de microplacas de fluorescencia Gemini (Molecular Devices).<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 2<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 2<\/strong>. Efecto de la inhibici\u00f3n de LOX sobre la activaci\u00f3n inflamatoria de EC inducida por LPS. EC pulmonar humana cultivada en 2,8 (300 \u00b5M) y luego estimulada con LPS (200 ng\/ml) durante 48 horas con o sin BAPN. A \u2013 La producci\u00f3n de IL-8 por EC estimulada con o sin BAPN fue evaluada en medio acondicionado por ensayo ELISA; *P<0,05. B: la expresi\u00f3n de ICAM-1 y VCAM-1 se determin\u00f3 mediante an\u00e1lisis de transferencia Western con anticuerpos espec\u00edficos. C: la expresi\u00f3n de ICAM-1 se examin\u00f3 mediante tinci\u00f3n de inmunofluorescencia de EC estimulada con el anticuerpo ICAM-1 (verde). Se us\u00f3 una contratinci\u00f3n con DAPI (azul) para visualizar los n\u00facleos celulares. D: las HPAEC se transfectaron con ARNsi no espec\u00edfico (nsRNA) o espec\u00edfico de LOX (si-LOX). La expresi\u00f3n de ICAM-1 se determin\u00f3 por western blot. La carga igual de prote\u00edna se confirm\u00f3 mediante un nuevo sondeo de membrana con anticuerpo de \u03b2-actina. La actividad LOX y la producci\u00f3n de interleucina-8 (IL-8) en medio acondicionado se midieron mediante el ensayo de actividad LOX (AAT Bioquest, Sunnyvale, CA) y el kit ELISA IL-8 (R&D Systems), respectivamente, seg\u00fan los fabricantes. ‘ instrucciones. Fuente: Gr\u00e1fico de la expresi\u00f3n GEF-H1 activada por rigidez exacerba la inflamaci\u00f3n pulmonar inducida por LPS de Isa Mambetsariev et al., PLOS, abril de 2014.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 3<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 3<\/strong>. Efectos de IL1\u03b2 y TGF\u03b21 sobre la expresi\u00f3n y nivel de actividad de lisil oxidasa en fibroblastos d\u00e9rmicos y pulmonares. (A-B) HDFa y HLFa se trataron con IL1\u03b2, TGF\u03b21 o una combinaci\u00f3n de ambos, durante 24 y 48 h. Los niveles de ARNm de LOX se midieron con qRT-PCR y se expresaron como cambio de veces en comparaci\u00f3n con el control no tratado. (C\u2013D) Cuantificaci\u00f3n de la actividad de lisil oxidasa secretada en el medio de cultivo por HDFa y HLFa tratados con IL1\u03b2, TGF\u03b21 o una combinaci\u00f3n de ambos durante 24 y 48 h. La actividad LOX se determin\u00f3 con el kit de ensayo fluorim\u00e9trico de lisil oxidasa Amplite (AAT Bioquest Inc, EE. UU.) de acuerdo con el protocolo del fabricante. Fuente: Gr\u00e1fico de Interleukin-1\u03b2 Attenuates Myofibroblast Formation and Extracelular Matrix Production in D\u00e9rmal and Lung Fibroblasts Exposed to Transforming Growth Factor-\u03b21 por Masum M et al., PLOS, marzo de 2014.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Productos Relacionados<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Nombre<\/td>Excitation (nm)<\/td>Emission (nm)<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Glucose Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Glutamate Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Monoamine Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Xanthine Oxidase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
    <\/div>\n\n\n\n

    BIbliograf\u00eda<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 51 bibliograf\u00edas:\u00a0<\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Cysteine oxidation of copper transporter CTR1 drives VEGFR2 signalling and angiogenesis<\/a>
    Authors: <\/strong>Das, Archita and Ash, Dipankar and Fouda, Abdelrahman Y and Sudhahar, Varadarajan and Kim, Young-Mee and Hou, Yali and Hudson, Farlyn Z and Stansfield, Brian K and Caldwell, Ruth B and McMenamin, Malgorzata and others,
    Journal: <\/strong>Nature Cell Biology (2022): 1–16<\/p>\n\n\n\n

    Exposure to oxLDL impairs TGF-$\\beta$ activity in human tendon cells<\/a>
    Authors: <\/strong>Mousavizadeh, Rouhollah and Waugh, Charlie M and DeBruin, Erin and McCormack, Robert G and Duronio, Vincent and Scott, Alex
    Journal: <\/strong>(2022)<\/p>\n\n\n\n

    Androgen supplement did not accelerate tunica albuginea remodeling to facilitate penile growth<\/a>
    Authors: <\/strong>Sun, Fa and Li, Tao and Jiang, Yiting and Jiang, Kehua and Tian, Ye and Wang, Zhen and Ban, Yong and Gu, Jiang
    Journal: <\/strong>(2022)<\/p>\n\n\n\n

    Lysyl oxidase directly contributes to extracellular matrix production and fibrosis in systemic sclerosis<\/a>
    Authors: <\/strong>Nguyen, Xinh-Xinh and Nishimoto, Tetsuya and Takihara, Takahisa and Mlakar, Logan and Bradshaw, Amy D and Feghali-Bostwick, Carol
    Journal: <\/strong>American Journal of Physiology-Lung Cellular and Molecular Physiology (2021): L29–L40<\/p>\n\n\n\n

    The P-type ATPase transporter ATP7A promotes angiogenesis by limiting autophagic degradation of VEGFR2<\/a>
    Authors: <\/strong>Ash, Dipankar and Sudhahar, Varadarajan and Youn, Seock-Won and Okur, Mustafa Nazir and Das, Archita and O\u2019Bryan, John P and McMenamin, Maggie and Hou, Yali and Kaplan, Jack H and Fukai, Tohru and others,
    Journal: <\/strong>Nature communications (2021): 1–16<\/p>\n\n\n\n

    An in situ activity assay for lysyl oxidases<\/a>
    Authors: <\/strong>Huilei, Wang and Poe, Alan and Pak, Lydia and Kavitha, Nandakumar and Sandeep, Jandu and Jochen, Steppan and Reik, L{\\”o}ser and Lakshmi, Santhanam
    Journal: <\/strong>Communications Biology (2021)<\/p>\n\n\n\n

    An In Situ Activity Assay For Lysyl Oxidases<\/a>
    Authors: <\/strong>Wang, Huilei and Poe, Alan and Pak, Lydia and Nandakumar, Kavitha and Jandu, Sandeep and Steppan, Jochen and L{\\”o}ser, Reik and Santhanam, Lakshmi
    Journal: <\/strong>Communications biology (2021): 1–10<\/p>\n\n\n\n

    Decrease lysyl oxidase activity in hearts of copper-deficient bovines<\/a>
    Authors: <\/strong>Postma, Gabriela Cintia and Nicastro, Carolina Natalia and Valdez, Laura Beatriz and Mikusic, Ivana Agustina Rukavina and Grecco, Andr{\\’e}s and Minatel, Leonardo
    Journal: <\/strong>Journal of Trace Elements in Medicine and Biology (2021): 126715<\/p>\n\n\n\n

    Elevated intracellular copper contributes a unique role to kidney fibrosis by lysyl oxidase mediated matrix crosslinking<\/a>
    Authors: <\/strong>Niu, Yang-yang and Zhang, Ying-ying and Zhu, Zhi and Zhang, Xiao-qin and Liu, Xi and Zhu, Sai-ya and Song, Ye and Jin, Xian and Lindholm, Bengt and Yu, Chen
    Journal: <\/strong>Cell death \\& disease (2020): 1–14<\/p>\n\n\n\n

    N-acetylcysteine maintains penile length and erectile function in bilateral cavernous nerve crush rat model by reducing penile fibrosis<\/a>
    Authors: <\/strong>Ma, Ming and Wu, Chang-Jing and Zhang, Peng and Li, Tao and Wei, Shan-Zun and Yu, Bo-Tao and Qin, Feng and Yuan, Jiu-Hong and others,
    Journal: <\/strong>Asian Journal of Andrology (2020): 0<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 21 referencias:\u00a0<\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Overexpression of lysyl oxidase to increase matrix crosslinking and improve tissue strength in dermal wound healing
    Authors: <\/strong>Lau YK, Gobin AM, West JL.
    Journal: <\/strong>Ann Biomed Eng (2006): 1239<\/p>\n\n\n\n

    Cellular fibronectin binds to lysyl oxidase with high affinity and is critical for its proteolytic activation
    Authors: <\/strong>Fogelgren B, Polgar N, Szauter KM, Ujfaludi Z, Laczko R, Fong KS, Csiszar K.
    Journal: <\/strong>J Biol Chem (2005): 24690<\/p>\n\n\n\n

    The Pro-regions of lysyl oxidase and lysyl oxidase-like 1 are required for deposition onto elastic fibers
    Authors: <\/strong>Thomassin L, Werneck CC, Broekelmann TJ, Gleyzal C, Hornstra IK, Mecham RP, Sommer P.
    Journal: <\/strong>J Biol Chem (2005): 42848<\/p>\n\n\n\n

    A molecular role for lysyl oxidase-like 2 enzyme in snail regulation and tumor progression
    Authors: <\/strong>Peinado H, Del Carmen Iglesias-de la Cruz M, Olmeda D, Csiszar K, Fong KS, Vega S, Nieto MA, Cano A, Portillo F.
    Journal: <\/strong>Embo J (2005): 3446<\/p>\n\n\n\n

    Lysyl oxidase is essential for normal development and function of the respiratory system and for the integrity of elastic and collagen fibers in various tissues
    Authors: <\/strong>Maki JM, Sormunen R, Lippo S, Kaarteenaho-Wiik R, Soininen R, Myllyharju J.
    Journal: <\/strong>Am J Pathol (2005): 927<\/p>\n\n\n\n

    Inhibition of lysyl oxidase activity can delay phenotypic modulation of chondrocytes in two-dimensional culture
    Authors: <\/strong>Farjanel J, Seve S, Borel A, Sommer P, Hulmes DJ.
    Journal: <\/strong>Osteoarthritis Cartilage (2005): 120<\/p>\n\n\n\n

    A peptide model of the copper-binding region of lysyl oxidase
    Authors: <\/strong>Ryvkin F, Greenaway FT.
    Journal: <\/strong>J Inorg Biochem (2004): 1427<\/p>\n\n\n\n

    The propeptide domain of lysyl oxidase induces phenotypic reversion of ras-transformed cells
    Authors: <\/strong>Palamakumbura AH, Jeay S, Guo Y, Pischon N, Sommer P, Sonenshein GE, Trackman PC.
    Journal: <\/strong>J Biol Chem (2004): 40593<\/p>\n\n\n\n

    Elastic fiber homeostasis requires lysyl oxidase-like 1 protein
    Authors: <\/strong>Liu X, Zhao Y, Gao J, Pawlyk B, Starcher B, Spencer JA, Yanagisawa H, Zuo J, Li T.
    Journal: <\/strong>Nat Genet (2004): 178<\/p>\n\n\n\n

    Enhancing mechanical properties of tissue-engineered constructs via lysyl oxidase crosslinking activity
    Authors: <\/strong>Elbjeirami WM, Yonter EO, Starcher BC, West JL.
    Journal: <\/strong>J Biomed Mater Res A (2003): 513<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Attenuation of lysyl oxidase and collagen gene expression in keratoconus patient corneal epithelium corresponds to disease severity<\/a>
    Copper Transport Protein Antioxidant-1 Promotes Inflammatory Neovascularization via Chaperone and Transcription Factor Function<\/a>
    Endothelial Antioxidant-1: a Key Mediator of Copper-dependent Wound Healing in vivo<\/a>
    Inhibition of Lysyl Oxidase by Cortisol Regeneration in Human Amnion<\/a>
    Interleukin-1\u03b2 Attenuates Myofibroblast Formation and Extracellular Matrix Production in Dermal and Lung Fibroblasts Exposed to Transforming Growth Factor-\u03b21<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Kit de ensayo fluorom\u00e9trico de lisil oxidasa Amplite\u00ae *Fluorescencia roja*. Este kit ofrece un ensayo fluorescente sensible para medir la actividad de LOX utilizando nuestro sustrato LOX patentado que libera per\u00f3xido de hidr\u00f3geno tras la oxidaci\u00f3n de LOX.<\/p>\n","protected":false},"featured_media":3152,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3164"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":6,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3164\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3743,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3164\/revisions\/3743"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3152"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3164"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3164"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}