{"id":3138,"date":"2023-01-09T13:57:55","date_gmt":"2023-01-09T19:57:55","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3138"},"modified":"2023-01-20T16:44:48","modified_gmt":"2023-01-20T22:44:48","slug":"amplite-fluorimetric-nad-nadh-ratio-assay-kit-red-fluorescence","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-fluorimetric-nad-nadh-ratio-assay-kit-red-fluorescence\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Fluorimetric NAD\/NADH Ratio Assay Kit *Red Fluorescence*"},"content":{"rendered":"\n

El dinucle\u00f3tido de nicotinamida y adenina (NAD+) y el fosfato de dinucle\u00f3tido de nicotinamida y adenina (NADP+) son dos cofactores importantes que se encuentran en las c\u00e9lulas. NADH es la forma reducida, NAD+ es la forma oxidada de NADH. Su forma NADP con la adici\u00f3n de un grupo fosfato a la posici\u00f3n 2′ del nucle\u00f3tido de adenilo a trav\u00e9s de un enlace \u00e9ster. El NADP se utiliza en reacciones biol\u00f3gicas anab\u00f3licas, como la s\u00edntesis de \u00e1cidos grasos y \u00e1cidos nucleicos, que requieren NADPH como agente reductor. Los ensayos tradicionales de NAD\/NADH y NADP\/NADPH se realizan monitoreando la absorci\u00f3n de NADH o NADPH a 340 nm. Este m\u00e9todo adolece de baja sensibilidad y alta interferencia, ya que el ensayo se realiza en el rango UV que requiere una microplaca de cuarzo costosa. <\/p>\n\n\n\n

Nuestro kit de ensayo de relaci\u00f3n NAD\/NADH Amplite\u00ae proporciona un m\u00e9todo conveniente para la detecci\u00f3n sensible de NAD, NADH y su relaci\u00f3n. Las enzimas del sistema reconocen espec\u00edficamente NAD\/NADH en una reacci\u00f3n de ciclo enzim\u00e1tico. No es necesario purificar NAD\/NADH de la mezcla de muestra. La reacci\u00f3n del ciclo enzim\u00e1tico aumenta significativamente la sensibilidad de detecci\u00f3n. Adem\u00e1s, este ensayo tiene un ruido de fondo muy bajo ya que se ejecuta en el rango rojo visible que reduce significativamente la interferencia de las muestras biol\u00f3gicas. El ensayo ha demostrado alta sensibilidad y baja interferencia. Este kit de ensayo de NAD\/NADH fluorom\u00e9trico Amplite\u00ae se puede realizar en un conveniente formato de placa de microtitulaci\u00f3n de 96 pozoso de 384 pozos y se puede adaptar f\u00e1cilmente a la automatizaci\u00f3n sin necesidad de pasos de separaci\u00f3n.<\/p>\n\n\n\n

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Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-15263<\/td>Amplite\u00ae Fluorimetric NAD\/NADH Ratio Assay Kit *Red Fluorescence*<\/td>250 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

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Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de microplacas de Fluorescencia <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>540 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>590 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>570 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Negra s\u00f3lida<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: NAD\/NADH Recycling Enzyme Mix<\/td>2 botellas (polvo liofilizado)<\/td><\/tr>
Componente B: NADH Sensor Buffer<\/td>1 botella (20 mL)<\/td><\/tr>
Componente C: NADH Standard<\/td>1 vial (142 \u00b5g)<\/td><\/tr>
Componente D: NADH Extraction Solution<\/td>1 botella (10 mL)<\/td><\/tr>
Componente E: NAD Extraction Solution<\/td>1 botella (10 mL)<\/td><\/tr>
Componente F: NAD\/NADH Control Solution<\/td>1 botella (10 mL)<\/td><\/tr>
Componente G: NAD\/NADH Lysis Buffer<\/td>1 botella (10 mL)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n.<\/em><\/p>\n\n\n\n

Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de NADH (1 mM)<\/em>
Agregue 200 \u00b5l de tamp\u00f3n PBS en el vial de est\u00e1ndar de NADH (componente C) para obtener una soluci\u00f3n madre de NADH de 1 mM (1 nmol\/\u00b5l).<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

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PREPARACION DE SOLUCION ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

Para mayor comodidad, utilice el Planificador de diluci\u00f3n en serie: https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/15263<\/a> <\/p>\n\n\n\n

Est\u00e1ndar NADH
Utilice la soluci\u00f3n est\u00e1ndar de NADH y el buffer PBS (pH 7,4) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de NADH de 30 \u00b5M (30 pmols\/\u00b5L) (NS7). Luego tome la soluci\u00f3n est\u00e1ndar de NADH de 30 \u00b5M para realizar diluciones en serie 1:3 para obtener los est\u00e1ndares de NADH diluidos en serie restantes (NS6-NS1). Nota: La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de NADH diluida es inestable y debe usarse dentro de las 4 horas.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

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PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

Agregue 10 ml de buffer del sensor de NADH (componente B) a la botella de mezcla de enzimas de reciclaje de NAD\/NADH (componente A) y mezcle bien.
Nota<\/strong>: Esta soluci\u00f3n de trabajo de NAD\/NADH es suficiente para 125 ensayos en una placa de 96 pocillos. La soluci\u00f3n de trabajo no es estable, util\u00edcela inmediatamente y evite la exposici\u00f3n directa a la luz.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

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PREPARACION CELULAR<\/p>\n\n\n\n

Para guia de la preparaci\u00f3n de muestras de c\u00e9lulas, visite https:\/\/www.aatbio.com\/resources\/guides\/cell-sample-preparation.html<\/a><\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

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Imagen<\/mark><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Figura 1.<\/strong> . La respuesta de NADH se midi\u00f3 con el kit de ensayo Fluorometrico NAD\/NADH Ratio Amplite\u00ae en una placa negra s\u00f3lida de 96 pozos utilizando un lector de microplacas Gemini (Molecular Devices).<\/p>\n\n\n\n

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Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

The coupling of mitoproteolysis and oxidative phosphorylation enables tracking of an active mitochondrial state through MitoTimer fluorescence<\/a>
Authors: <\/strong>Xie, Yinyin and Zhang, Yannan and Sun, Aina and Peng, Yamei and Hou, Weikang and Xiang, Cong and Zhang, Guoxin and Lai, Beibei and Hou, Xiaoshuang and Zheng, Fangfang and others,
Journal: <\/strong>Redox biology (2022): 102447<\/p>\n\n\n\n

The Linkage of Yeast Metabolites, Produced Under Hyperosmotic Stress, to Cellular Cofactor Systems During Icewine Fermentation.<\/a>
Authors: <\/strong>Allie, Robert
Journal: <\/strong>(2022)<\/p>\n\n\n\n

Rapamycin Modulates the Proinflammatory Memory-Like Response of Microglia Induced by BAFF<\/a>
Authors: <\/strong>Wang, Jianing and Yang, Chunshu and Hou, Xiaoyu and Xu, Jingyi and Yun, Yang and Qin, Ling and Yang, Pingting
Journal: <\/strong>Frontiers in Immunology (2021): 1649<\/p>\n\n\n\n

New Insights Into the Antibacterial Mechanism of Cryptotanshinone, a Representative Diterpenoid Quinone From Salvia miltiorrhiza Bunge<\/a>
Authors: <\/strong>Chen, Bo-Chen and Ding, Zhi-Shan and Dai, Jian-Sheng and Chen, Ni-Pi and Gong, Xing-Wen and Ma, Lie-Feng and Qian, Chao-Dong
Journal: <\/strong>Frontiers in Microbiology (2021): 372<\/p>\n\n\n\n

TFB2M activates aerobic glycolysis in hepatocellular carcinoma cells through the NAD+\/SIRT3\/HIF-1$\\alpha$ signaling<\/a>
Authors: <\/strong>Chang, Hulin and Li, Jibin and Luo, Ying and Wu, Bing and Yuan, Chong and Geng, Xilin
Journal: <\/strong>Journal of Gastroenterology and Hepatology (2021)<\/p>\n\n\n\n

Elucidating the mechanism by which synthetic helper peptides sensitize Pseudomonas aeruginosa to multiple antibiotics<\/a>
Authors: <\/strong>Xia, Yushan and Cebri{\\’a}n, Rub{\\’e}n and Xu, Congjuan and Jong, Anne de and Wu, Weihui and Kuipers, Oscar P
Journal: <\/strong>PLoS pathogens (2021): e1009909<\/p>\n\n\n\n

TpiA is a Key Metabolic Enzyme That Affects Virulence and Resistance to Aminoglycoside Antibiotics through CrcZ in Pseudomonas aeruginosa<\/a>
Authors: <\/strong>Xia, Yushan and Wang, Dan and Pan, Xiaolei and Xia, Bin and Weng, Yuding and Long, Yuqing and Ren, Huan and Zhou, Jingyi and Jin, Yongxin and Bai, Fang and others,
Journal: <\/strong>mBio (2020)<\/p>\n\n\n\n

Growth suppression by altered (p) ppGpp levels results from non-optimal resource allocation in Escherichia coli<\/a>
Authors: <\/strong>Zhu, Manlu and Dai, Xiongfeng
Journal: <\/strong>Nucleic acids research (2019)<\/p>\n\n\n\n

NOX4 modulates macrophage phenotype and mitochondrial biogenesis in asbestosis
Authors: <\/strong>He, Chao and Larson-Casey, Jennifer L and Davis, Dana and Hanumanthu, Vidya Sagar and Longhini, Ana Leda F and Thannickal, Victor J and Gu, Linlin and Carter, A Brent
Journal: <\/strong>JCI insight (2019)<\/p>\n\n\n\n

Lactate and glycerol-3-phosphate metabolism cooperatively regulate growth and redox balance during Drosophila melanogaster larval development
Authors: <\/strong>Li, Hongde and Buddika, Kasun and Sterrett, Maria C and Julick, Cole R and Pletcher, Rose C and Gosney, Chelsea J and Burton, Anna K and Karty, Jonathan A and Montooth, Kristi L and Sokol, Nicholas S and others,
Journal: <\/strong>bioRxiv (2019): 517532<\/p>\n\n\n\n

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Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a>
An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults<\/a>
Attenuation of lysyl oxidase and collagen gene expression in keratoconus patient corneal epithelium corresponds to disease severity<\/a><\/p>\n\n\n\n

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Kit de ensayo de relaci\u00f3n NAD\/NADH fluorim\u00e9trica, *Fluorescencia roja* Nuestro kit proporciona un m\u00e9todo conveniente para la detecci\u00f3n sensible de NAD, NADH y su relaci\u00f3n. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":3139,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3138"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":6,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3138\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3747,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3138\/revisions\/3747"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3139"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3138"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3138"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}