{"id":3089,"date":"2023-01-08T16:51:46","date_gmt":"2023-01-08T22:51:46","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3089"},"modified":"2023-02-03T12:55:03","modified_gmt":"2023-02-03T18:55:03","slug":"amplite-fluorimetric-hydrogen-peroxide-assay-kit-red-fluorescence","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-fluorimetric-hydrogen-peroxide-assay-kit-red-fluorescence\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence*"},"content":{"rendered":"\n

El per\u00f3xido de hidr\u00f3geno (H2O2) es un subproducto metab\u00f3lico del ox\u00edgeno reactivo que sirve como regulador clave para una serie de estados relacionados con el estr\u00e9s oxidativo. Est\u00e1 involucrado en una serie de eventos biol\u00f3gicos que se han relacionado con el asma, la aterosclerosis, la vasculopat\u00eda diab\u00e9tica, la osteoporosis, una serie de enfermedades neurodegenerativas y el s\u00edndrome de Down. Quiz\u00e1s el aspecto m\u00e1s intrigante de la biolog\u00eda del H2O2 es el informe reciente de que los anticuerpos tienen la capacidad de convertir el ox\u00edgeno molecular en per\u00f3xido de hidr\u00f3geno para contribuir a los procesos normales de reconocimiento y destrucci\u00f3n del sistema inmunitario. La medici\u00f3n de esta especie reactiva ayudar\u00e1 a determinar c\u00f3mo el estr\u00e9s oxidativo modula diversas v\u00edas intracelulares. <\/p>\n\n\n\n

El kit de ensayo de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno Amplite\u00ae utiliza nuestro sustrato de peroxidasa Amplite\u00ae Red para cuantificar el per\u00f3xido de hidr\u00f3geno en soluciones y extractos celulares. Tambi\u00e9n se puede usar para detectar una variedad de actividades de oxidasa a trav\u00e9s de reacciones acopladas a enzimas. El kit es un ensayo de “mezcla y lectura” optimizado que es compatible con los instrumentos de manipulaci\u00f3n de l\u00edquidos HTS.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-11501<\/td>Amplite\u00ae Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Red Fluorescence*<\/td>500 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
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\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Flourescencia<\/mark> <\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>540 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>590 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>570 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Negra s\u00f3lida<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Amplite\u2122 Red Peroxidase Substrate<\/td>1 vial<\/td><\/tr>
Componente B: H2O2<\/td>1 vial (3% soluci\u00f3n estabilizadora, 200 \u00b5L)<\/td><\/tr>
Componente C: Buffer de ensayo<\/td>1 botella (100 mL)<\/td><\/tr>
Componente D: Horseradish Peroxidase<\/td>1 vial (20 unidades)<\/td><\/tr>
Componente E: DMSO<\/td>1 vial (1 mL)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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Espectro <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades Espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>571<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>584<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
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PREPARACION DE SOLUCIONES DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n. <\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n madre de sustrato de peroxidasa roja Amplite\u2122 (100X):<\/em>
    Agregue 250 \u00b5L de DMSO (Componente E) en el vial de Amplite\u2122 Red Substrate (Componente A). Esta soluci\u00f3n madre debe usarse con prontitud.<\/li>
  2. Soluci\u00f3n madre de peroxidasa (20 U\/mL):<\/em>
    Agregue 1 ml de buffer de ensayo (componente C) al vial de peroxidasa de r\u00e1bano picante (componente D).<\/li>
  3. Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de H2O2 (20 mM):<\/em>
    Agregue 22,7 \u00b5L de H2O2 al 3 % (0,88 M, componente B) en 977 \u00b5L de buffer de ensayo (componente C). Nota: la soluci\u00f3n de H2O2 diluida no es estable. Las porciones no utilizadas deben desecharse.<\/li><\/ol>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n
    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCION ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

    Est\u00e1ndar de H2O2<\/em><\/p>\n\n\n\n

    Para su conveniencia puede usar el Planificador de diluci\u00f3n en serie: https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/11501<\/a><\/p>\n\n\n\n


    Agregue 1 \u03bcl de soluci\u00f3n madre de H2O2 20 mM en 1999 \u03bcl de buffer de ensayo (componente C) para obtener un est\u00e1ndar de H2O2 10 \u03bcM (HS7). Tome el est\u00e1ndar de H2O2 10 \u00b5M y realice diluciones en serie 1:3 para obtener diluciones en serie del est\u00e1ndar de H2O2 (HS6 – HS1).<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

    Agregue 50 \u03bcL de soluci\u00f3n madre de sustrato de peroxidasa roja Amplite\u2122 (100X) y 200 \u03bcL de soluci\u00f3n madre de peroxidasa (20 U\/ml) en 4,75 ml de buffer de ensayo (componente C) para obtener un volumen total de 5 ml. Nota: Mantener alejado de la luz.<\/p>\n\n\n\n

    Para guia sobre la preparaci\u00f3n de muestras de c\u00e9lulas, visite: https:\/\/www.aatbio.com\/resources\/guides\/cell-sample-preparation.html<\/a><\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

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    Fig. 1<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1<\/strong>. La respuesta a la dosis de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno se midi\u00f3 en una placa negra s\u00f3lida de 384 pocillos con el kit de ensayo de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno Flourimetric Amplite\u00ae utilizando un lector de microplacas de fluorescencia Gemini (Molecular Devices).<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig 2.<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 2.<\/strong> Concentraciones de Concentraciones de H2O2 producido por DA solo y con varios p\u00e9ptidos de la secuencia C-terminal de \u03b1-syn 15 min (gris claro), 30 min (gris oscuro) y 60 min (negro) despu\u00e9s de la incubaci\u00f3n. La DA sola (sin p\u00e9ptido) produjo cantidades crecientes de H2O2 con el tiempo. La coincubaci\u00f3n de DA con el p\u00e9ptido YEMPS mejor\u00f3 la producci\u00f3n de H2O2, mientras que los p\u00e9ptidos que carec\u00edan de Y127- (EMPSEEGY) y S129- (NEAYEMP) produjeron menos H2O2 que la DA sola o con el p\u00e9ptido YEMPS. Adem\u00e1s, la coincubaci\u00f3n de DA con el p\u00e9ptido mutado en metionina (YEAPS) produjo las mayores cantidades de H2O2 entre todas las condiciones. *p<0,01 frente a ning\u00fan p\u00e9ptido, **p<0,01 frente a ning\u00fan p\u00e9ptido y YEMPS (ANOVA). *Fuente: Gr\u00e1fico de la oxidaci\u00f3n mediada por dopamina de metionina 127 en \u03b1-sinucle\u00edna causa citotoxicidad y oligomerizaci\u00f3n de \u03b1-sinucle\u00edna por Kazuhiro Nakaso, et al., PLOS ONE, febrero de 2013.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 3<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 3.<\/strong> El tratamiento con GW9662 en c\u00e9lulas C22 induce la actividad de PPRE y la regulaci\u00f3n positiva de PPAR\u03b1. Las c\u00e9lulas C22 se trataron con antagonista de PPAR\u03b3 (GW9662) durante 24 h con una concentraci\u00f3n de 5 \u03bcM.
    El ARN total se aisl\u00f3 de estos cultivos y se someti\u00f3 a an\u00e1lisis qRT-PCR para PPAR\u03b1 (A). Para la normalizaci\u00f3n se utiliz\u00f3 la expresi\u00f3n del gen dom\u00e9stico HPRT. Los valores \u00b1 SEM representan la inducci\u00f3n de veces relativa media de tres experimentos independientes. **P \u22640,01; ***P\u22640,001. Se midi\u00f3 la actividad indicadora de luciferasa dual de PPRE en c\u00e9lulas C22 tratadas con control (Con) o GW9662 (B). La actividad de luciferasa se midi\u00f3 en lisados celulares y se normaliz\u00f3 a la actividad de renilla. (E.V-vector vac\u00edo). Los datos representan \u00b1 SD de tres experimentos independientes, valor P, prueba t de Student no apareada. Los sobrenadantes del cultivo se recolectaron y se sometieron a un ensayo de H2O2 seg\u00fan las instrucciones de fabricaci\u00f3n (C). Fuente: La inducci\u00f3n de peroxisoma mediada por PPAR\u03b1 compensa la deficiencia de PPAR\u03b3 en las c\u00e9lulas del club bronquiolar por Srikanth Karnati et al., PLOS, septiembre de 2018.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 16 bibliograf\u00edas: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Neutrophil-Biomimetic \u201cNanobuffer\u201d for Remodeling the Microenvironment in the Infarct Core and Protecting Neurons in the Penumbra via Neutralization of Detrimental Factors to Treat Ischemic Stroke<\/a>
    Authors: <\/strong>Liu, Shanshan and Xu, Jianpei and Liu, Yipu and You, Yang and Xie, Laozhi and Tong, Shiqiang and Chen, Yu and Liang, Kaifan and Zhou, Songlei and Li, Fengan and others,
    Journal: <\/strong>ACS Applied Materials \\& Interfaces (2022): 27743–27761<\/p>\n\n\n\n

    Macrophage-Disguised Manganese Dioxide Nanoparticles for Neuroprotection by Reducing Oxidative Stress and Modulating Inflammatory Microenvironment in Acute Ischemic Stroke<\/a>
    Authors: <\/strong>Li, Chao and Zhao, Zhenhao and Luo, Yifan and Ning, Tingting and Liu, Peixin and Chen, Qinjun and Chu, Yongchao and Guo, Qin and Zhang, Yiwen and Zhou, Wenxi and others,
    Journal: <\/strong>Advanced Science (2021): 2101526<\/p>\n\n\n\n

    Redox-channeling polydopamine-ferrocene (PDA-Fc) coating to confer context-dependent and photothermal antimicrobial activities<\/a>
    Authors: <\/strong>Song, Jialin and Liu, Huan and Lei, Miao and Tan, Haoqi and Chen, Zhanyi and Antoshin, Artem and Payne, Gregory F and Qu, Xue and Liu, Changsheng
    Journal: <\/strong>ACS applied materials \\& interfaces (2020): 8915–8928<\/p>\n\n\n\n

    The polyamine putrescine promotes human epidermal melanogenesis<\/a>
    Authors: <\/strong>Sridharan, Aishwarya and Shi, Meng and Leo, Vonny Ivon and Subramaniam, Nagavidya and Lim, Thiam Chye and Uemura, Takeshi and Igarashi, Kazuei and Guan, Steven Thng Tien and Tan, Nguan Soon and Vardy, Leah A
    Journal: <\/strong>Journal of Investigative Dermatology (2020)<\/p>\n\n\n\n

    Molecular hydrogen suppresses superoxide generation in the mitochondrial complex I and reduced mitochondrial membrane potential<\/a>
    Authors: <\/strong>Ishihara, Genki and Kawamoto, Kosuke and Komori, Nobuaki and Ishibashi, Toru
    Journal: <\/strong>Biochemical and Biophysical Research Communications (2019)<\/p>\n\n\n\n

    Peroxisomes in endocrine pancreatic islets, possible protectors against lipotoxicity?
    Authors: <\/strong>del Rocio Bonilla-Martinez, Hermelinda
    Journal: <\/strong>(2018)<\/p>\n\n\n\n

    PPAR\u03b1-mediated peroxisome induction compensates PPAR\u03b3-deficiency in bronchiolar club cells<\/a>
    Authors: <\/strong>Karnati, Srikanth and Oruqaj, Gani and Janga, Harshavardhan and Tumpara, Srinu and Colasante, Claudia and Van Veldhoven, Paul P and Braverman, Nancy and Pilatz, Adrian and Mariani, Thomas J and Baumgart-Vogt, Eveline
    Journal: <\/strong>PloS one (2018): e0203466<\/p>\n\n\n\n

    Bio-inspired redox-cycling antimicrobial film for sustained generation of reactive oxygen species<\/a>
    Authors: <\/strong>Liu, Huan and Qu, Xue and Kim, Eunkyoung and Lei, Miao and Dai, Kai and Tan, Xiaoli and Xu, Miao and Li, Jinyang and Liu, Yangping and Shi, Xiaowen and others, undefined
    Journal: <\/strong>Biomaterials (2018)<\/p>\n\n\n\n

    Functional Characterization of Peroxisomes in the Heart and the Role of Pex11 [alpha] and Pex14 in Cardiomyocytes
    Authors: <\/strong>Chen, Jiangping
    Journal: <\/strong>(2017)<\/p>\n\n\n\n

    Semaphorin 4D inhibits neutrophil activation and is involved in the pathogenesis of neutrophil-mediated autoimmune vasculitis<\/a>
    Authors: <\/strong>Nishide, Masayuki and Nojima, Satoshi and Ito, Daisuke and Takamatsu, Hyota and Koyama, Shohei and Kang, Sujin and Kimura, Tetsuya and Morimoto, Keiko and Hosokawa, Takashi and Hayama, Yoshitomo and others, undefined
    Journal: <\/strong>Annals of the Rheumatic Diseases (2017): annrheumdis–2016<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 152 referencias: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Genetically encoded fluorescent indicator for intracellular hydrogen peroxide
    Authors: <\/strong>Belousov VV, Fradkov AF, Lukyanov KA, Staroverov DB, Shakhbazov KS, Terskikh AV, Lukyanov S.
    Journal: <\/strong>Nat Methods (2006): 281<\/p>\n\n\n\n

    Effects of hydrogen peroxide (H(2)O(2)) on alkaline phosphatase activity and matrix mineralization of odontoblast and osteoblast cell lines
    Authors: <\/strong>Lee DH, Lim BS, Lee YK, Yang HC.
    Journal: <\/strong>Cell Biol Toxicol (2006): 39<\/p>\n\n\n\n

    Fluorescent quenching method for determination of trace hydrogen peroxide in rain water
    Authors: <\/strong>Chen H, Yu H, Zhou Y, Wang L.
    Journal: <\/strong>Spectrochim Acta A Mol Biomol Spectrosc. (2006)<\/p>\n\n\n\n

    A parallel proteomic and metabolomic analysis of the hydrogen peroxide- and Sty1p-dependent stress response in Schizosaccharomyces pombe
    Authors: <\/strong>Weeks ME, Sinclair J, Butt A, Chung YL, Worthington JL, Wilkinson CR, Griffiths J, Jones N, Waterfield MD, Timms JF.
    Journal: <\/strong>Proteomics (2006): 2772<\/p>\n\n\n\n

    Comparative effects of alpha-tocopherol and gamma-tocotrienol against hydrogen peroxide induced apoptosis on primary-cultured astrocytes
    Authors: <\/strong>Mazlan M, Sue Mian T, Mat Top G, Zurinah Wan Ngah W.
    Journal: <\/strong>J Neurol Sci (2006): 5<\/p>\n\n\n\n

    Enzymatic oxidation of dipyridamole in homogeneous and micellar solutions in the horseradish peroxidase-hydrogen peroxide system
    Authors: <\/strong>Almeida LE, Imasato H, Tabak M.
    Journal: <\/strong>Biochim Biophys Acta (2006): 216<\/p>\n\n\n\n

    Specific aquaporins facilitate the diffusion of hydrogen peroxide across membranes
    Authors: <\/strong>Bienert GP, Moller AL, Kristiansen KA, Schulz A, Moller IM, Schjoerring JK, Jahn TP.
    Journal: <\/strong>J Biol Chem. (2006)<\/p>\n\n\n\n

    Simple and rapid determination of hydrogen peroxide using phosphine-based fluorescent reagents with sodium tungstate dihydrate
    Authors: <\/strong>Onoda M, Uchiyama T, Mawatari K, Kaneko K, Nakagomi K.
    Journal: <\/strong>Anal Sci (2006): 815<\/p>\n\n\n\n

    Cardioprotective role of endogenous hydrogen peroxide during ischemia-reperfusion injury in canine coronary microcirculation in vivo
    Authors: <\/strong>Yada T, Shimokawa H, Hiramatsu O, Haruna Y, Morita Y, Kashihara N, Shinozaki Y, Mori H, Goto M, Ogasawara Y, Kajiya F.
    Journal: <\/strong>Am J Physiol Heart Circ Physiol (2006): H1138<\/p>\n\n\n\n

    Effect of antisense oligonucleotide against Smac\/DIABLO on inhibition of hydrogen peroxide induced myocardial apoptosis of neonatal rats
    Authors: <\/strong>Liang PF, Huang XY, Long JH, Xiao MZ, Yang XH, Zhang PH.
    Journal: <\/strong>Zhonghua Shao Shang Za Zhi (2006): 175<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Dopamine-Mediated Oxidation of Methionine 127 in \u03b1-Synuclein<\/a>
    Hydrogen peroxide detection with high specificity in living cells and inflamed tissues<\/a>
    A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
    Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
    Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a><\/p>\n\n\n\n

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    Kit de ensayo de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno fluorim\u00e9trico Amplite\u00ae *Fluorescencia roja*. Este kit utiliza nuestro sustrato de peroxidasa Amplite\u00ae Red para cuantificar el per\u00f3xido de hidr\u00f3geno en soluciones y extractos celulares. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":3092,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3089"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":13,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3089\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":4495,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3089\/revisions\/4495"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3092"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3089"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3089"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}