{"id":3039,"date":"2023-01-08T12:09:39","date_gmt":"2023-01-08T18:09:39","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3039"},"modified":"2023-01-20T16:50:51","modified_gmt":"2023-01-20T22:50:51","slug":"amplite-fluorimetric-total-thiol-quantitation-assay-kit-green-fluorescence","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-fluorimetric-total-thiol-quantitation-assay-kit-green-fluorescence\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Fluorimetric Total Thiol Quantitation Assay Kit *Green Fluorescence*"},"content":{"rendered":"\n

La detecci\u00f3n y medici\u00f3n de tiol libre (como ciste\u00edna libre, glutati\u00f3n y residuos de ciste\u00edna en prote\u00ednas) es una de las tareas esenciales para investigar procesos y eventos biol\u00f3gicos en muchos sistemas biol\u00f3gicos. El seguimiento del glutati\u00f3n reducido (GSH) y oxidado en muestras biol\u00f3gicas es esencial para evaluar el estado redox y de desintoxicaci\u00f3n de c\u00e9lulas y tejidos en relaci\u00f3n con el papel protector del glutati\u00f3n frente a la lesi\u00f3n celular oxidativa y mediada por radicales libres. <\/p>\n\n\n\n

Los trastornos del metabolismo de la ciste\u00edna incluyen la cistinosis, una enfermedad autos\u00f3mica recesiva producida por un defecto en el transporte lisosomal, y la cistinuria, un trastorno hereditario com\u00fan del transporte de amino\u00e1cidos. Hay pocos reactivos o kits de ensayo disponibles para cuantificar tioles en sistemas biol\u00f3gicos. Sin embargo, todos los kits comerciales carecen de sensibilidad o tienen protocolos tediosos. <\/p>\n\n\n\n

Nuestro kit de determinaci\u00f3n de tioles totales fluorim\u00e9tricos Amplite\u00ae proporciona un ensayo fluorom\u00e9trico ultrasensible para cuantificar los tioles que existen en una mol\u00e9cula peque\u00f1a. El kit utiliza un tinte no fluorescente patentado que se vuelve fuertemente fluorescente al reaccionar con el tiol. El kit proporciona un m\u00e9todo fluorom\u00e9trico sensible de un solo paso para detectar tan solo 1 picomol de ciste\u00edna o GSH en un volumen de ensayo de 100 \u00b5L (concentraci\u00f3n de 10 nM). <\/p>\n\n\n\n

El ensayo es r\u00e1pido y robusto. Se puede realizar en un conveniente formato de placa de microtitulaci\u00f3n de 96 pozos o de 384 pozos y se puede adaptar f\u00e1cilmente a la automatizaci\u00f3n. Para la cuantificaci\u00f3n r\u00e1pida de grupos tiol en una prote\u00edna, le recomendamos que utilice nuestro kit cat\u00e1logo 5529 que est\u00e1 optimizado para cuantificar tioles de prote\u00ednas.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-5524<\/td>Amplite\u00ae Fluorimetric Total Thiol Quantitation Assay Kit *Green Fluorescence*<\/td>200 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n
\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Flourescencia<\/mark> <\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>490 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>525 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>515 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Negra s\u00f3lida<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Thiolite\u2122 Green<\/td>1 vial<\/td><\/tr>
Componente B: Buffer de ensayo<\/td>1 botella (25 mL)<\/td><\/tr>
Componente C: GSH Standard<\/td>1 vial (62 \u00b5g)<\/td><\/tr>
Componente D: DMSO<\/td>1 vial (400 \u00b5L)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Espectro <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades Espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>510<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>525<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n

PREPARACION DE SOLUCIONES DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n. <\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH (1 mM)<\/em>
    Agregue 200 \u00b5L de ddH2O en el vial de GSH Standard (Componente C) para preparar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 1 mM (1 nmol\/\u00b5L).<\/li>
  2. Soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green (100X)<\/em>
    Agregue 100 \u00b5L de DMSO (Componente D) en el vial de Thiolite\u2122 Green (Componente A) para preparar una soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 100X.
    Nota Alternativamente, si se observa precipitaci\u00f3n mientras se prepara la soluci\u00f3n de trabajo, se puede preparar una soluci\u00f3n madre 50X usando 200 \u00b5L de soluci\u00f3n de DMSO.<\/li><\/ol>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n
    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCION ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

    Para su conveniencia puede utilizar el Planificador de diluci\u00f3n en serie:<\/p>\n\n\n\n

    https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/5524<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Est\u00e1ndar GSH<\/em>
    Agregue 30 \u03bcL de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 1 mM (1 nmol\/\u03bcL) a 970 \u03bcL de buffer de ensayo (componente B) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 30 \u03bcM (30 pmol\/\u03bcL). Tome una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH de 30 \u03bcM (30 pmol\/\u03bcL) y realice diluciones en serie 1:3 para obtener est\u00e1ndares de GSH diluidos en serie (SD7-SD1) con buffer de ensayo (componente B). Nota:<\/strong> La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de GSH diluida es inestable. \u00daselo dentro de las primeras 4 horas.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCIONES DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

    Agregue 50 \u03bcL de soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 100X en 5 mL de buffer de ensayo (componente B) y mezcle bien para preparar la soluci\u00f3n de trabajo de GSH.
    Nota<\/strong>: Esta soluci\u00f3n de trabajo de GSH es suficiente para una placa de 96 pocillos. Es inestable a temperatura ambiente y se debe usar dentro de las primeras 2 horas. Evite la exposici\u00f3n a la luz.
    Nota<\/strong>: Como alternativa, se puede preparar una soluci\u00f3n de trabajo de GSH agregando una soluci\u00f3n madre de Thiolite\u2122 Green 100X con buffer de ensayo (componente B) proporcionalmente.
    Nota Si se observa precipitaci\u00f3n con este protocolo, se puede realizar una diluci\u00f3n 50X (consulte la nota en la soluci\u00f3n madre (2)) y usar 100 \u00b5L de soluci\u00f3n madre 50X Thiolite\u2122 Green en 5 mL de ubber de ensayo (componente B).<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Imagen<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    \"\"<\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1<\/strong>. Las respuestas a la dosis de GSH y ciste\u00edna se midieron en una placa negra s\u00f3lida de 96 pozos con el kit de ensayo de cuantificaci\u00f3n de tiol fluorim\u00e9trico Amplite\u00ae usando un lector de microplacas NOVOstar (BMG Labtech).<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Perlecan-targeted nanoparticles for drug delivery to triple-negative breast cancer<\/a>
    Authors: <\/strong>Khanna, Vidhi and Kalscheuer, Stephen and Kirtane, Ameya and Zhang, Wenqui and Panyam, Jayanth
    Journal: <\/strong>Future Drug Discovery (2019)<\/p>\n\n\n\n

    Improving Payload Capacity and Anti-Tumor Efficacy of Mesenchymal Stem Cells Using TAT Peptide Functionalized Polymeric Nanoparticles<\/a>
    Authors: <\/strong>Moku, Gopikrishna and Layek, Buddhadev and Trautman, Lana and Putnam, Samuel and Panyam, Jayanth and Prabha, Swayam
    Journal: <\/strong>Cancers (2019): 491<\/p>\n\n\n\n

    Antibody Conjugated Nanoparticles for Targeting Metastatic Triple Negative Breast Cancer
    Authors: <\/strong>Khanna, Vidhi Devendra
    Journal: <\/strong>(2016)<\/p>\n\n\n\n

    Activation of transcription factors in human bronchial epithelial cells exposed to aqueous extracts of mainstream cigarette smoke in vitro<\/a>
    Authors: <\/strong>Sekine, Takashi and Hirata, Tadashi and Mine, Toshiki and Fukano, Yasuo
    Journal: <\/strong>Toxicology mechanisms and methods (2016): 22–31<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 26 referencias: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Covalent surface chemistry gradients for presenting bioactive peptides
    Authors: <\/strong>Kipper MJ, Kleinman HK, Wang FW.
    Journal: <\/strong>Anal Biochem (2007): 175<\/p>\n\n\n\n

    Dansyl glutathione as a trapping agent for the quantitative estimation and identification of reactive metabolites
    Authors: <\/strong>Gan J, Harper TW, Hsueh MM, Qu Q, Humphreys WG.
    Journal: <\/strong>Chem Res Toxicol (2005): 896<\/p>\n\n\n\n

    Gold nanoparticle-based detection of genomic DNA targets on microarrays using a novel optical detection system
    Authors: <\/strong>Storhoff JJ, Marla SS, Bao P, Hagenow S, Mehta H, Lucas A, Garimella V, Patno T, Buckingham W, Cork W, Muller UR.
    Journal: <\/strong>Biosens Bioelectron (2004): 875<\/p>\n\n\n\n

    Fluorometric polyethyleneglycol-peptide hybrid substrates for quantitative assay of protein disulfide isomerase
    Authors: <\/strong>Christiansen C, St Hilaire PM, Winther JR.
    Journal: <\/strong>Anal Biochem (2004): 148<\/p>\n\n\n\n

    Assay of total homocysteine and other thiols by capillary electrophoresis and laser-induced fluorescence detection. II. Pre-analytical and analytical conditions
    Authors: <\/strong>Bayle C, Issac C, Salvayre R, Couderc F, Causse E.
    Journal: <\/strong>J Chromatogr A (2002): 255<\/p>\n\n\n\n

    A continuous fluorescence assay for sulfhydryl oxidase
    Authors: <\/strong>Raje S, Glynn NM, Thorpe C.
    Journal: <\/strong>Anal Biochem (2002): 266<\/p>\n\n\n\n

    Plasma total homocysteine and other thiols analyzed by capillary electrophoresis\/laser-induced fluorescence detection: comparison with two other methods
    Authors: <\/strong>Causse E, Malatray P, Calaf R, Charpiot P, C and ito M, Bayle C, Valdiguie P, Salvayre R, Couderc F.
    Journal: <\/strong>Electrophoresis (2000): 2074<\/p>\n\n\n\n

    Assays for total homocysteine and other thiols by capillary electrophoresis-laser-induced fluorescence detection. I. Preanalytical condition studies
    Authors: <\/strong>Causse E, Issac C, Malatray P, Bayle C, Valdiguie P, Salvayre R, Couderc F.
    Journal: <\/strong>J Chromatogr A (2000): 173<\/p>\n\n\n\n

    Measurement of thiols in human plasma using liquid chromatography with precolumn derivatization and fluorescence detection
    Authors: <\/strong>Salazar JF, Schorr H, Herrmann W, Herbeth B, Siest G, Leroy P.
    Journal: <\/strong>J Chromatogr Sci (1999): 469<\/p>\n\n\n\n

    Quantitation of homocysteine in human plasma by capillary electrophoresis and laser-induced fluorescence detection
    Authors: <\/strong>Causse E, Terrier R, Champagne S, Nertz M, Valdiguie P, Salvayre R, Couderc F.
    Journal: <\/strong>J Chromatogr A (1998): 181<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
    Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
    Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a>
    An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults<\/a>
    Attenuation of lysyl oxidase and collagen gene expression in keratoconus patient corneal epithelium corresponds to disease severity<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Kit de ensayo de cuantificaci\u00f3n de tiol total fluorim\u00e9trico Amplite\u00ae *Fluorescencia verde*. Nuestro kit proporciona un ensayo fluorom\u00e9trico ultrasensible para cuantificar los tioles que existen en una mol\u00e9cula peque\u00f1a. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":3040,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3039"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":13,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3039\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3753,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3039\/revisions\/3753"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3040"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3039"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3039"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}