{"id":3026,"date":"2023-01-08T10:52:51","date_gmt":"2023-01-08T16:52:51","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3026"},"modified":"2023-01-20T16:52:21","modified_gmt":"2023-01-20T22:52:21","slug":"screen-quest-fluo-8-no-wash-calcium-assay-kit","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/screen-quest-fluo-8-no-wash-calcium-assay-kit\/","title":{"rendered":"Screen Quest\u2122 Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit"},"content":{"rendered":"\n

Los ensayos de flujo de calcio son m\u00e9todos preferidos en el descubrimiento de f\u00e1rmacos para la detecci\u00f3n de receptores acoplados a prote\u00edna G (GPCR). El kit de ensayo de calcio Screen Quest\u2122 Fluo-8 NW proporciona un ensayo homog\u00e9neo basado en fluorescencia para detectar la movilizaci\u00f3n de calcio intracelular. Las c\u00e9lulas que expresan un GPCR de inter\u00e9s que emite se\u00f1ales a trav\u00e9s del calcio est\u00e1n precargadas con nuestro Fluo-8 NW patentado que puede atravesar la membrana celular. <\/p>\n\n\n\n

Fluo-8 NW es el indicador de calcio m\u00e1s brillante disponible para la detecci\u00f3n de HTS. Una vez dentro de la c\u00e9lula, los grupos bloqueadores lipof\u00edlicos de Fluo-8 AM son escindidos por esterasa celular no espec\u00edfica, lo que da como resultado un tinte fluorescente con carga negativa que permanece dentro de las c\u00e9lulas y su fluorescencia aumenta considerablemente al unirse al calcio. Cuando las c\u00e9lulas se estimulan con compuestos de detecci\u00f3n, el receptor se\u00f1ala la liberaci\u00f3n de calcio intracelular, lo que aumenta en gran medida la fluorescencia de Fluo-8 NW. Las caracter\u00edsticas de su longitud de onda larga, alta sensibilidad y aumentos de fluorescencia de 100 a 250 veces (cuando forma complejos con calcio) hacen de Fluo-8 NW un indicador ideal para la medici\u00f3n de calcio celular. <\/p>\n\n\n\n

Este kit de ensayo de calcio Screen Quest Fluo-8 NW proporciona un m\u00e9todo de ensayo optimizado para monitorear los receptores acoplados a prote\u00edna G (GPCR) y los canales de calcio. El ensayo se puede realizar en un conveniente formato de placa de microtitulaci\u00f3n de 96 pozos o de 384 pozos y se puede adaptar f\u00e1cilmente a la automatizaci\u00f3n.   Disponible en tres diferentes presentaciones: 1 placa, 10 placas o 100 placas.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-36314<\/td>Screen Quest\u2122 Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit<\/td>1 placa<\/td><\/tr>
AAT-36315<\/td>Screen Quest\u2122 Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit<\/td>10 placas<\/td><\/tr>
AAT-36316<\/td>Screen Quest\u2122 Fluo-8 No Wash Calcium Assay Kit<\/td>100 placas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
\n
\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Flourescencia <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>490 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>525 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>510 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Paredes negras, fondo claro<\/td><\/tr>
Especificaciones instrumento<\/td>Modo de lectura inferior \/ Manejo de l\u00edquidos programable<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n

Otros Instrumentos: ArrayScan, FDSS, FLIPR, FlexStation, IN Cell Analyzer, NOVOStar, ViewLux<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Fluo-8 NW<\/td>10 viales, liofilizados<\/td><\/tr>
Componente B: 10X Pluronic\u00ae F127 Plus<\/td>10 botellas (10ml\/botella)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Espectro<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Factor de correcci\u00f3n (260 nm)<\/td>1.076<\/td><\/tr>
Factor de correcci\u00f3n (280 nm)<\/td>0.769<\/td><\/tr>
Coeficiente de extinci\u00f3n (cm -1<\/sup> M -1<\/sup>)<\/td>23430<\/td><\/tr>
Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>495<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>516<\/td><\/tr>
Rendimiento cu\u00e1ntico<\/td>0.161<\/sup><\/td><\/tr><\/tbody><\/table>
1<\/sup> Calcium bound (pH 7.2)<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n.<\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n madre Fluo-8 NW:<\/em>
    Agregue 20 \u00b5L (para Cat. # 36314) o 200 \u00b5L (para Cat. # 36315 y # 36316) de DMSO en el vial de Fluo-8 NW (Componente A) y mezcle bien. Nota: 20 \u03bcL de soluci\u00f3n madre Fluo-8 NW es suficiente para una placa. La soluci\u00f3n madre de Fluo-8 NW no utilizada puede dividirse en al\u00edcuotas y almacenarse a < -20 o<\/sup>C durante m\u00e1s de un mes si los tubos est\u00e1n sellados herm\u00e9ticamente. Proteger de la luz y evitar ciclos repetidos de congelaci\u00f3n-descongelaci\u00f3n.<\/li>
  2. Buffer de ensayo (1X):<\/em>
    a) Para el Cat. # 36314 (kit de 1 placa) y # 36315 (kit de 10 placas), prepare buffer de ensayo 1X agregando 9 mL de HHBS (Componente C) en 10X Pluronic\u00ae F127 Plus (1 mL, Componente B) y m\u00e9zclelos bien.
    b) Para el Cat. # 36316 (kit de 100 placas), prepare buffer de ensayo 1X agregando el frasco completo de 10 X Pluronic\u00ae F127 Plus (10 ml, componente B) en 90 ml de buffer HHBS (no incluido en el kit) y m\u00e9zclelos bien . Nota: 10 ml de buffer de ensayo 1X son suficientes para una placa. Haga al\u00edcuotas y almacene el buffer de ensayo 1X no utilizado a < -20 o<\/sup>C. Proteger de la luz y evitar ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n<\/li><\/ol>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n
    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

    \n

    Soluci\u00f3n de carga de tinte Fluo-8 NW:<\/em>
    Agregue 20 \u03bcL de soluci\u00f3n madre Fluo-8 NW en 10 mL de buffer de ensayo 1X y mezcle bien. Nota: Esta soluci\u00f3n de trabajo es estable durante al menos 2 horas a temperatura ambiente.<\/p>\n\n\n\n

    Para obtener guia sobre la preparaci\u00f3n de muestras de c\u00e9lulas, visite<\/p>\n\n\n\n

    https:\/\/www.aatbio.com\/resources\/guides\/cell-sample-preparation.html<\/a><\/p>\n<\/div><\/div>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    \"\"
    Fig. 1<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1<\/strong>. La respuesta a la dosis de carbacol se midi\u00f3 en c\u00e9lulas HEK-293 con el kit de ensayo de calcio sin lavado Screen Quest\u2122 Fluo-8 y el kit de ensayo de calcio Fluo-4 NW  Catalogo # 36324<\/strong>.  Se sembraron 40.000 c\u00e9lulas HEK-293 \/100 \u00b5l\/pozo  durante la noche a en una placa de 96 pozos Costar de pared negra\/fondo transparente. Las c\u00e9lulas se incubaron con 100 \u00b5L de soluci\u00f3n de colorante utilizando el kit de ensayo de calcio Screen Quest\u2122 Fluo-8 No Wash o el kit Fluo-4 NW (seg\u00fan las instrucciones del fabricante) durante 1 hora a temperatura ambiente. NOVOstar (BMG Labtech) a\u00f1adi\u00f3 carbacol (50 \u00b5l\/pozo) para alcanzar las concentraciones finales indicadas.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 2<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 2<\/strong>. Generaci\u00f3n de grandes l\u00e1minas de tejido card\u00edaco (L-CTS).
    (A) Vista \u00f3ptima del L-CTS colocado en un plato UpCell de 10 cm. Barra de escala = 1 mm. (B) (C) Calcio transitorio de L-CTS. (B) Imagen representativa de Fluo-8 de L-CTS (ver tambi\u00e9n video S1) y regi\u00f3n de inter\u00e9s (ROI). Aumento \u00d7100. (C) Cambio de intensidad cronol\u00f3gica de Fluo-8. Tenga en cuenta que los tiempos m\u00e1ximos de 4 ROI diferentes son casi iguales cronol\u00f3gicamente. Fuente: Hojas de tejido card\u00edaco derivadas de c\u00e9lulas iPS humanas para la restauraci\u00f3n funcional de corazones porcinos infartados por Masanosuke Ishigami et al., PLOS, agosto de 2018.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

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    <\/div>\n\n\n\n

    Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 217 bibliografias: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

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    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a>
    Evaluation of FLIPR Calcium Assays for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a>
    A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a>
    Evaluation of FLIPR Calcium Assays for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a>
    A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    AssayWise (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Multicolor Intracellular Calcium Detection Probes<\/a>
    Cal-520\u2122 Calcium Indicators<\/a>
    Cal-590\u2122 Calcium Indicators<\/a>
    Cal-630\u2122 Calcium Indicators<\/a>
    Fluo-8\u00ae Calcium Indicators<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Kit de ensayo de calcio sin lavado Screen Quest\u2122 Fluo-8. Este kit proporciona un ensayo homog\u00e9neo basado en fluorescencia para detectar la movilizaci\u00f3n de calcio intracelular. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":3027,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3026"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":7,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3026\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3755,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3026\/revisions\/3755"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3027"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3026"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3026"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}