{"id":3017,"date":"2023-01-08T10:10:59","date_gmt":"2023-01-08T16:10:59","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=3017"},"modified":"2023-01-20T16:53:06","modified_gmt":"2023-01-20T22:53:06","slug":"cell-meter-flow-cytometric-calcium-assay-kit","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/cell-meter-flow-cytometric-calcium-assay-kit\/","title":{"rendered":"Cell Meter\u2122 Flow Cytometric Calcium Assay Kit"},"content":{"rendered":"\n

El kit de ensayo de calcio por citom\u00e9tria de flujo Cell Meter\u2122 proporciona ensayos basados \u200b\u200ben fluorescencia para detectar la movilizaci\u00f3n de calcio intracelular mediante un cit\u00f3metro de flujo. Se puede utilizar para lectura cin\u00e9tica o para lectura de punto final. <\/p>\n\n\n\n

Despu\u00e9s de cargar el colorante Calbryte\u2122 520 AM en las c\u00e9lulas de inter\u00e9s, simplemente lave las c\u00e9lulas y agregue el agonista de flujo de calcio, luego puede leer la muestra a trav\u00e9s de un cit\u00f3metro de flujo usando el modo de lectura cin\u00e9tica o el modo de lectura de punto final. Calbryte\u2122 520 AM puede cruzar la membrana celular de forma pasiva por difusi\u00f3n. Una vez dentro de las c\u00e9lulas, los grupos bloqueadores lipof\u00edlicos de Calbryte\u2122 520 AM son escindidos por la esterasa, lo que da como resultado un tinte fluorescente cargado negativamente que permanece dentro de las c\u00e9lulas. Su fluorescencia aumenta mucho al unirse al calcio. Cuando las c\u00e9lulas que expresan GPCR de inter\u00e9s se estimulan con un agonista, el receptor se\u00f1ala la liberaci\u00f3n de calcio intracelular, lo que aumenta significativamente la fluorescencia de Calbryte\u2122 520. <\/p>\n\n\n\n

El kit de ensayo de calcio por citometr\u00eda de flujo Cell Meter\u2122 se puede utilizar para monitorear el flujo de calcio celular y clasificar las c\u00e9lulas.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-36310<\/td>Cell Meter\u2122 Flow Cytometric Calcium Assay Kit<\/td>100 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
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\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Cit\u00f3metro de Flujo <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n laser<\/td>488 nm<\/td><\/tr>
Filtro de Emisi\u00f3n<\/td>530\/30 nm<\/td><\/tr>
Especificaciones instrumento<\/td>Canal FITC<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n

Otros instrumentos: ArrayScan, FDSS, FlexStation, IN Cell Analyzer, NOVOStar, ViewLux<\/p>\n\n\n\n

<\/p>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: Calbryte\u2122 520 AM<\/td>1 vial, liofilizado<\/td><\/tr>
Componente B: Buffer de ensayo<\/td>1 botella (50 ml)<\/td><\/tr>
Componente C: HHBS  Probenecid (Opcional)<\/td>1 botella (10 mL, 25mM)<\/td><\/tr>
Componente D: HHBS (Hanks\u2019 con 20 mM Hepes)<\/td>1 botella (100 mL)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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Espectro<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>493<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>515<\/td><\/tr>
Rendimiento cu\u00e1ntico<\/td>0.751<\/sup><\/td><\/tr><\/tbody><\/table>
1<\/sup> Calcium bound (pH 7.2)<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

PREPARACION DE SOLUCION DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

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Calbryte\u2122 520 AM soluci\u00f3n madre (500X):<\/em>
Agregue 100 \u00b5l de DMSO (no incluido) en el vial de soluci\u00f3n madre Calbryte\u2122 520 AM (componente A) y m\u00e9zclelos bien. Nota: 100 \u00b5L de soluci\u00f3n madre Calbryte\u2122 520 AM es suficiente para 100 ensayos. La soluci\u00f3n madre de Calbryte\u2122 520 AM sin usar se puede dividir en al\u00edcuotas y almacenar a < -20 \u00b0C durante m\u00e1s de un mes si los tubos est\u00e1n sellados herm\u00e9ticamente. Proteger de la luz y evitar ciclos repetidos de congelaci\u00f3n-descongelaci\u00f3n.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

\"\"
Fig. 1<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Figura 1<\/strong>. La liberaci\u00f3n de calcio intracelular inducida por ATP se midi\u00f3 con el kit de ensayo de calcio para citom\u00e9tria de flujo Cell Meter\u2122 en c\u00e9lulas CHO-K1. Las c\u00e9lulas se incubaron con colorante Calbryte\u2122 520 AM durante 30 min a 37 \u00b0C antes de a\u00f1adir ATP 10 \u00b5M a las c\u00e9lulas. Se adquiri\u00f3 la l\u00ednea de base y el resto de las c\u00e9lulas se analizaron despu\u00e9s de la adici\u00f3n de ATP. La respuesta se midi\u00f3 a lo largo del tiempo. El an\u00e1lisis se realiz\u00f3 en el cit\u00f3metro de flujo NovoCyte\u2122 3000. Las flechas en el gr\u00e1fico indican el tiempo (30 segundos) entre la adici\u00f3n de ATP y el an\u00e1lisis real.<\/p>\n\n\n\n

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\"\"
Fig. 2<\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

Figura 2.<\/strong> La liberaci\u00f3n de calcio intracelular dependiente de la dosis de ATP se midi\u00f3 con el kit de ensayo de calcio citom\u00e9trico de flujo Cell Meter\u2122 en c\u00e9lulas CHO-K1. Las c\u00e9lulas se incubaron con colorante Calbryte\u2122 520 AM durante 30 min a 37 \u00b0C antes de agregar ATP a las c\u00e9lulas. Se adquiri\u00f3 la l\u00ednea de base y el resto de las c\u00e9lulas se analizaron despu\u00e9s de la adici\u00f3n de ATP. La respuesta se midi\u00f3 a lo largo del tiempo. El an\u00e1lisis se realiz\u00f3 en el cit\u00f3metro de flujo NovoCyte\u2122 3000. A. Se a\u00f1adieron ATP 10 \u00b5M, 1 \u00b5M o 0 \u00b5M a las c\u00e9lulas. Las flechas en el gr\u00e1fico indican el tiempo (30 segundos) entre la adici\u00f3n de ATP y el an\u00e1lisis real. B. Cambios dependientes del tiempo de la se\u00f1al fluorescente.<\/p>\n\n\n\n

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Productos Relacionados<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Cell Meter\u2122 Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Green Fluorescence*<\/a><\/td><\/tr>
Cell Meter\u2122 Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Blue Fluorescence*<\/a><\/td><\/tr>
Cell Meter\u2122 Intracellular Fluorimetric Hydrogen Peroxide Assay Kit *Blue Fluorescence Optimized for Flow Cytometry*<\/a><\/td><\/tr>
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Cell Meter\u2122 Fluorimetric Intracellular Nitric Oxide (NO) Activity Assay Kit *Orange Fluorescence Optimized for Microplate Reader*<\/a><\/td><\/tr>
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Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

Inhibition of P110$\\alpha$ and P110$\\delta$ catalytic subunits of PI3 kinase reverses impaired arterial healing after injury in hypercholesterolemic male mice<\/a>
Authors: <\/strong>Chaudhuri, Pinaki and Smith, Andrew H and Graham, Linda M and Rosenbaum, Michael A
Journal: <\/strong>American Journal of Physiology-Cell Physiology (2021): C943–C955<\/p>\n\n\n\n

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Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Ver todas las 34 referencias: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

Fluorescence absorbance inner-filter decomposition: the role of emission shape on estimates of free Ca(2+) using Rhod-2
Authors: <\/strong>Territo PR, Heil J, Bose S, Evans FJ, Balaban RS.
Journal: <\/strong>Appl Spectrosc (2007): 138<\/p>\n\n\n\n

Protein kinase C and myocardial calcium handling during ischemia and reperfusion: lessons learned using Rhod-2 spectrofluorometry
Authors: <\/strong>Stamm C, del Nido PJ.
Journal: <\/strong>Thorac Cardiovasc Surg (2004): 127<\/p>\n\n\n\n

Novel fluo-4 analogs for fluorescent calcium measurements
Authors: <\/strong>Martin VV, Beierlein M, Morgan JL, Rothe A, Gee KR.
Journal: <\/strong>Cell Calcium (2004): 509<\/p>\n\n\n\n

Kinetic characterization of novel NR2B antagonists using fluorescence detection of calcium flux
Authors: <\/strong>Bednar B, Cunningham ME, Kiss L, Cheng G, McCauley JA, Liverton NJ, Koblan KS.
Journal: <\/strong>J Neurosci Methods (2004): 247<\/p>\n\n\n\n

Cytosolic calcium in the ischemic rabbit heart: assessment by pH- and temperature-adjusted rhod-2 spectrofluorometry
Authors: <\/strong>Stamm C, Friehs I, Choi YH, Zurakowski D, McGowan FX, del Nido PJ.
Journal: <\/strong>Cardiovasc Res (2003): 695<\/p>\n\n\n\n

Calcium measurements in perfused mouse heart: quantitating fluorescence and absorbance of Rhod-2 by application of photon migration theory
Authors: <\/strong>Du C, MacGowan GA, Farkas DL, Koretsky AP.
Journal: <\/strong>Biophys J (2001): 549<\/p>\n\n\n\n

Calibration of the calcium dissociation constant of Rhod(2)in the perfused mouse heart using manganese quenching
Authors: <\/strong>Du C, MacGowan GA, Farkas DL, Koretsky AP.
Journal: <\/strong>Cell Calcium (2001): 217<\/p>\n\n\n\n

Changes in mitochondrial Ca2+ detected with Rhod-2 in single frog and mouse skeletal muscle fibres during and after repeated tetanic contractions
Authors: <\/strong>Lannergren J, Westerblad H, Bruton JD.
Journal: <\/strong>J Muscle Res Cell Motil (2001): 265<\/p>\n\n\n\n

Rhod-2 based measurements of intracellular calcium in the perfused mouse heart: cellular and subcellular localization and response to positive inotropy
Authors: <\/strong>MacGowan GA, Du C, Glonty V, Suhan JP, Koretsky AP, Farkas DL.
Journal: <\/strong>J Biomed Opt (2001): 23<\/p>\n\n\n\n

Mitochondrial free calcium levels (Rhod-2 fluorescence) and ultrastructural alterations in neuronally differentiated PC12 cells during ceramide-dependent cell death
Authors: <\/strong>Muriel MP, Lambeng N, Darios F, Michel PP, Hirsch EC, Agid Y, Ruberg M.
Journal: <\/strong>J Comp Neurol (2000): 297<\/p>\n\n\n\n

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Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

A Comparison of Fluorescent Red Calcium Indicators for Detecting Intracellular Calcium Mobilization in CHO Cells<\/a>
A Meta-Analysis of Common Calcium Indicators<\/a>
A New Red Fluorescent & Robust Screen Quest\u2122 Rhod-4\u2122 Ca2+Indicator for Screening GPCR & Ca2+ Channel Targets<\/a>
A New Robust No-Wash FLIPR Calcium Assay Kit for Screening GPCR and Calcium Channel Targets<\/a>
A Novel NO Wash Probeniceid-Free Calcium Assay for Functional Analysis of GPCR and Calcium Channel Targets<\/a><\/p>\n\n\n\n

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Kit de ensayo de calcio por citometr\u00eda de flujo, Cell Meter\u2122 Este kit proporciona ensayos basados \u200b\u200ben fluorescencia para detectar la movilizaci\u00f3n de calcio intracelular mediante un cit\u00f3metro de flujo. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":3022,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3017"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":8,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3017\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3607,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/3017\/revisions\/3607"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/3022"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=3017"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=3017"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}