{"id":2910,"date":"2023-01-06T18:11:53","date_gmt":"2023-01-07T00:11:53","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=2910"},"modified":"2023-01-19T13:35:46","modified_gmt":"2023-01-19T19:35:46","slug":"amplite-colorimetric-acetylcholinesterase-assay-kit","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-colorimetric-acetylcholinesterase-assay-kit\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Colorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit"},"content":{"rendered":"\n

La acetilcolinesterasa, tambi\u00e9n conocida como AChE, es una enzima que degrada (a trav\u00e9s de su actividad hidrol\u00edtica) el neurotransmisor acetilcolina, produciendo colina y un grupo acetato. Se encuentra principalmente en uniones neuromusculares y sinapsis colin\u00e9rgicas en el sistema nervioso central, donde su actividad sirve para terminar la transmisi\u00f3n sin\u00e1ptica. AChE tiene una actividad catal\u00edtica muy alta: cada mol\u00e9cula de AChE degrada alrededor de 5000 mol\u00e9culas de acetilcolina por segundo. La acetilcolinesterasa tambi\u00e9n se encuentra en las membranas de los gl\u00f3bulos rojos, donde constituye el ant\u00edgeno del grupo sangu\u00edneo Yt. La acetilcolinesterasa existe en m\u00faltiples formas moleculares, que poseen propiedades catal\u00edticas similares, pero difieren en su ensamblaje oligom\u00e9rico y modo de uni\u00f3n a la superficie celular. <\/p>\n\n\n\n

Este kit de ensayo colorim\u00e9trico de acetilcolinesterasa proporciona un m\u00e9todo conveniente para detectar la actividad de AChE. El kit utiliza DTNB para cuantificar la tiolcolina producida a partir de la hidr\u00f3lisis de acetiltiolcolina por AChE. La intensidad de absorci\u00f3n del aducto de DTNB es proporcional a la formaci\u00f3n de tiolcolina y, por lo tanto, a la actividad de AChE.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-11400<\/td>Amplite\u00ae Colorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit<\/td>200 pruebas<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

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Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Absorbancia <\/mark><\/p>\n\n\n\n

Absorbancia<\/td>410 \u00b1 5 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Fondo Claro<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Componente A: DTNB<\/td>1 vial <\/td><\/tr>
Componente B: Buffer de ensayo<\/td>1 botella (25 mL)<\/td><\/tr>
Componente C: Acetylthiocholine<\/td>1 vial <\/td><\/tr>
Componente D: Acetylcholinesterase Standard<\/td>1 vial (5 unidades)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
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PREPARACION DE SOLUCIONES DE STOCK<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n. <\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n madre de DTNB (20X):<\/em>
    Agregue 0,6 ml de buffer de ensayo (componente B) al vial de DTNB (componente A) para preparar una soluci\u00f3n madre de DTNB 20X. Mantener alejado de la luz. Nota: DNTB no es f\u00e1cil de disolver, es normal ver la turbidez de la soluci\u00f3n. Se puede utilizar el sobrenadante o la mezcla para el experimento.<\/li>
  2. Soluci\u00f3n madre de acetiltiocolina (20X):<\/em>
    Agregue 0,6 ml de ddH2O en el vial de acetiltiocolina (componente C) para preparar una soluci\u00f3n madre de acetiltiocolina 20X.<\/li>
  3. Soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa (50 U\/mL):<\/em>
    Agregue 100 \u00b5l de ddH2O con BSA al 0,1 % en el vial de est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa (componente D) para preparar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa de 50 U\/ml.<\/li><\/ol>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n
    \n\n\n\n
    \n

    PREPARACION DE SOLUCION ESTANDAR<\/p>\n\n\n\n

    Est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa<\/em><\/p>\n\n\n\n

    Para mayor comodidad, utilice el Planificador de diluci\u00f3n en serie: https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/11400<\/a>
    Agregue 20 \u00b5L de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa de 50 U\/ml a 980 \u00b5L de buffer de ensayo (componente B) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa de 1000 mU\/ml (AS7). Luego tome 1000 mU\/mL de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa (AS7) y realice diluciones en serie 1:3 en buffer de ensayo (componente B) para obtener est\u00e1ndares de acetilcolinesterasa diluidos en serie (AS6 – AS1). Nota: La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de acetilcolinesterasa diluida es inestable y debe usarse dentro de las primeras 4 horas.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    \n\n\n\n
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    PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO<\/p>\n\n\n\n

    Agregue 250 \u03bcl de soluci\u00f3n madre de DTNB 20X y 250 \u03bcl de soluci\u00f3n madre de acetiltiocolina 20X en 4,5 ml de buffer de ensayo (componente B) para obtener un volumen total de 5 ml de soluci\u00f3n de trabajo de AChE. Mantener alejado de la luz.<\/p>\n<\/div><\/div>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Para una guia sobre la preparaci\u00f3n de muestras de c\u00e9lulas, visite
    https:\/\/www.aatbio.com\/resources\/guides\/cell-sample-preparation.html<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Imagenes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

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    Fig. 1<\/em><\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1.<\/strong> La respuesta a la dosis de acetilcolinesterasa se midi\u00f3 en una placa de 96 pocillos de fondo blanco\/transparente con el kit de ensayo colorim\u00e9trico de acetilcolinesterasa Amplite\u00ae utilizando un lector de microplacas SpectraMax (Molecular devices). Se pueden detectar niveles tan bajos como 0,1 mU\/pocillo de acetilcolinesterasa con 30 minutos de incubaci\u00f3n (n=3).<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 2<\/em><\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 2.<\/strong> Respuesta de Ca2+ de los reticulocitos a la estimulaci\u00f3n con LPA. (A) Una imagen representativa de una nueva tinci\u00f3n de gl\u00f3bulos rojos con azul de metileno de un rat\u00f3n BALB\/c despu\u00e9s de la inducci\u00f3n de reticulocitosis. Las regiones coloreadas representan reticulocitos analizados en (B) y (C). Las puntas de flecha apuntan a gl\u00f3bulos rojos lisados. (B) Imagen de RBC vivos cargados con Fluo-4. Las regiones coloreadas se transfieren desde (A). El c\u00edrculo gris discontinuo marca un RBC que responde. (C) Trazas de intensidad para el contenido de Ca2+ de las c\u00e9lulas marcadas en (B) estimuladas con LPA. (D) Estad\u00edsticas de la respuesta m\u00e1xima de reticulocitos y toda la poblaci\u00f3n de gl\u00f3bulos rojos sin reticulocitos (denominados eritrocitos) en condiciones de control y para estimulaci\u00f3n con LPA de 5 \u00b5M. Los n\u00fameros debajo de los recuadros dan los n\u00fameros de celda tomados de tres ratones. (E) Actividad de AChE en reticulocitos y eritrocitos con y sin estimulaci\u00f3n con LPA 5 \u00b5M durante 15 min. Las medidas comprenden un ensayo colorim\u00e9trico basado en 2×106 c\u00e9lulas por medida y los datos son el promedio de 5 ratones. *La actividad de acetilcolinesterasa (AChE) de 2 \u00d7 106 gl\u00f3bulos rojos de cada poblaci\u00f3n se realiz\u00f3 utilizando un kit de ensayo colorim\u00e9trico de AChE (Amplite, AAT Bioquest, EE. UU.) siguiendo las instrucciones del fabricante. Fuente: Gr\u00e1fico de gl\u00f3bulos rojos morfol\u00f3gicamente homog\u00e9neos que presentan una respuesta heterog\u00e9nea a la estimulaci\u00f3n hormonal por Jue Wang et al., PLOS, junio de 2013.<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"
    Fig. 3<\/em><\/figcaption><\/figure>\n\n\n\n

    Figura 3.<\/strong> Niveles hipocampales de AChE, CREB y prote\u00ednas neurotr\u00f3ficas. La actividad de AChE (A) en el hipocampo se midi\u00f3 con un kit ELISA. Se mostr\u00f3 el ensayo de transferencia Western para los niveles de CREB, BDNF y NGF fosforilados en tejidos del hipocampo (B) y los niveles de BDNF en c\u00e9lulas HT22 (C) y sus intensidades relativas (D). Los datos se expresan como medias \u00b1 SD (n = 7 o 3). #P < 0,05, ##P < 0,01 y ###P < 0,001 en comparaci\u00f3n con el grupo de veh\u00edculos; *P < 0,05, **P < 0,01 y ***P < 0,001 en comparaci\u00f3n con el grupo de control. *La actividad de acetilcolinesterasa (AChE) en el hipocampo se determin\u00f3 utilizando un kit de ensayo de actividad de AChE (AAT Bioquest; Sunnyvale, CA, EE. UU.) de acuerdo con el protocolo del fabricante. La absorbancia a 410 nm se midi\u00f3 usando un espectrofot\u00f3metro UV. Fuente: Gr\u00e1fico de Gongjin-Dan Enhances Hippocampal Memory in a Mouse Model of Scopolamine-Induced Amnesia de Jin-Seok Lee et al., PLOS, agosto de 2016.<\/p>\n\n\n\n

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    Productos Relacionados<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Nombre<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit *Green Fluorescence*<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Fluorimetric Acetylcholinesterase Assay Kit *Red Fluorescence*<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric Sphingomyelinase Assay Kit *Blue Color*<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric Pyruvate Assay Kit<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric Glycerol Assay Kit<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric Oxaloacetate Assay Kit *Red Color*<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric Xanthine Assay Kit<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric NADH Assay Kit<\/a><\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Colorimetric NADPH Assay Kit<\/a><\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
    <\/div>\n\n\n\n

    Bibliograf\u00eda<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 56 bibliografi\u00edas:\u00a0<\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    Synergistic protective effect of Beta vulgaris with meso-2, 3-dimercaptosuccinic acid against lead-induced neurotoxicity in male rats<\/a>
    Authors: <\/strong>Shaban, Nadia Z and Abd El-Kader, Sara E and Mogahed, Fayed AK and El-Kersh, Mohamed AL and Habashy, Noha H
    Journal: <\/strong>Scientific Reports (2021): 1–18<\/p>\n\n\n\n

    Adlay hull extracts attenuate $\\beta$-amyloid-induced neurotoxicity and oxidative stress in PC12 cells through antioxidative, anti-inflammatory, and antiapoptotic activities<\/a>
    Authors: <\/strong>Tsay, Gregory J and Lin, Yu-Ta and Hsu, Chia-Hong and Tang, Feng-Yao and Kuo, Yueh-Hsiung and Chao, Che-Yi
    Journal: <\/strong>Biochemistry and Biophysics Reports (2021): 101020<\/p>\n\n\n\n

    Identification of Compounds for Butyrylcholinesterase Inhibition<\/a>
    Authors: <\/strong>Li, Shuaizhang and Li, Andrew J and Travers, Jameson and Xu, Tuan and Sakamuru, Srilatha and Klumpp-Thomas, Carleen and Huang, Ruili and Xia, Menghang
    Journal: <\/strong>SLAS DISCOVERY: Advancing the Science of Drug Discovery (2021): 24725552211030897<\/p>\n\n\n\n

    Neuroprotective derivatives of tacrine that target NMDA receptor and acetyl cholinesterase-Design, synthesis and biological evaluation<\/a>
    Authors: <\/strong>Chandran, Remya and Vijayan, Dileep and Reddy, Eeda Koti and Kumar, Mantosh and Kesavan, Lakshmi and Jacob, Reena and Ayyiliyath, Sajith and Variyar, Jayadevi and Anwar, Shaik and Zhang, Kam and others,
    Journal: <\/strong>bioRxiv (2021)<\/p>\n\n\n\n

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    Authors: <\/strong>Lim, Gyeong Taek and You, Dong Gil and Han, Hwa Seung and Lee, Hansang and Shin, Sol and Oh, Byeong Hoon and Kumar, EK Pramod and Um, Wooram and Kim, Chan Ho and Han, Seungsu and others,
    Journal: <\/strong>Journal of extracellular vesicles (2021): e12077<\/p>\n\n\n\n

    Profiling the Tox21 Chemical Collection for Acetylcholinesterase Inhibition<\/a>
    Authors: <\/strong>Li, Shuaizhang and Zhao, Jinghua and Huang, Ruili and Travers, Jameson and Klumpp-Thomas, Carleen and Yu, Wenbo and MacKerell Jr, Alexander D and Sakamuru, Srilatha and Ooka, Masato and Xue, Fengtian and others,
    Journal: <\/strong>Environmental health perspectives (2021): 047008<\/p>\n\n\n\n

    Long-Term Tolerance Acquisition and Changes in Acetylcholinesterase Activity in Three Cladoceran Species After a 48-H Pulsed Exposure to Pirimicarb<\/a>
    Authors: <\/strong>Ishimota, Makoto and Tajiki-Nishino, Risako and Fukuyama, Tomoki and Tomiyama, Naruto and Sakamoto, Masaki and Ohyama, Kazutoshi
    Journal: <\/strong>Water Air Soil Pollut (2020): 287<\/p>\n\n\n\n

    Huperzine a in treatment of amyloid-$\\beta$-associated neuropathology in a mouse model of alzheimer disease: abridged secondary<\/a>
    Authors: <\/strong>Yuan, Q and Lin, ZX and Wu, W and Albert, WN and Zee, BCY
    Journal: <\/strong>Hong Kong Med J (2020)<\/p>\n\n\n\n

    Traditional Korean herbal formulae, Yuk-Mi-Ji-Hwang-Tang, ameliorates impairment of hippocampal memory ability by chronic restraint stress of mouse model<\/a>
    Authors: <\/strong>Eom, Tae-Min and Kwon, Hyeok-Hee and Shin, Nara and Kim, Dong-Woon and Fang, Zhigang and Seol, In-Chan and Kim, Yoon-Sik and Kim, Hyeong-Geug and Yoo, Ho-Ryong
    Journal: <\/strong>Journal of Ethnopharmacology (2020): 113102<\/p>\n\n\n\n

    adiponectin gene therapy for alzheimer disease in a mouse model: abridged secondary<\/a>
    Authors: <\/strong>Ng, RCL and Jian, M and Yick, LW and Bunting, M and Kwan, JSC and Chung, SK and Chan, KH
    Journal: <\/strong>edical ournal (2020): 27<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Expression and DNA microarray analysis of a platelet activating factor-related molecule in severe pneumonia in mice due to influenza virus and bacterial co-infection
    Authors: <\/strong>Seki M, Kosai K, Hara A, Imamura Y, Nakamura S, Kurihara S, Izumikawa K, Kakeya H, Yamamoto Y, Yanagihara K, Miyazaki Y, Mukae H, Tashiro T, Kohno S.
    Journal: <\/strong>Jpn J Infect Dis (2009): 6<\/p>\n\n\n\n

    Activation of the nitric oxide-cGMP pathway reduces phasic contractions in neonatal rat bladder strips via protein kinase G
    Authors: <\/strong>Artim DE, Kullmann FA, Daugherty SL, Wu HY, de Groat WC.
    Journal: <\/strong>Am J Physiol Renal Physiol (2009): F333<\/p>\n\n\n\n

    hChAT: a tool for the chemoenzymatic generation of potential acetyl\/butyrylcholinesterase inhibitors
    Authors: <\/strong>Green KD, Fridman M, Garneau-Tsodikova S.
    Journal: <\/strong>Chembiochem (2009): 2191<\/p>\n\n\n\n

    Dietary high protein and vitamin C mitigates endosulfan toxicity in the spotted murrel, Channa punctatus (Bloch, 1793)
    Authors: <\/strong>Sarma K, Pal AK, Sahu NP, Ayyappan S, Baruah K.
    Journal: <\/strong>Sci Total Environ (2009): 3668<\/p>\n\n\n\n

    Physalin B inhibits Rhodnius prolixus hemocyte phagocytosis and microaggregation by the activation of endogenous PAF-acetyl hydrolase activities
    Authors: <\/strong>Castro DP, Figueiredo MB, Genta FA, Ribeiro IM, Tomassini TC, Azambuja P, Garcia ES.
    Journal: <\/strong>J Insect Physiol (2009): 532<\/p>\n\n\n\n

    Neuroprotective role of Convolvulus pluricaulis on aluminium induced neurotoxicity in rat brain
    Authors: <\/strong>Bihaqi SW, Sharma M, Singh AP, Tiwari M.
    Journal: <\/strong>J Ethnopharmacol (2009): 409<\/p>\n\n\n\n

    Synergistic activation of vascular TRPC6 channel by receptor and mechanical stimulation via phospholipase C\/diacylglycerol and phospholipase A2\/omega-hydroxylase\/20-HETE pathways
    Authors: <\/strong>Inoue R, Jensen LJ, Jian Z, Shi J, Hai L, Lurie AI, Henriksen FH, Salomonsson M, Morita H, Kawarabayashi Y, Mori M, Mori Y, Ito Y.
    Journal: <\/strong>Circ Res (2009): 1399<\/p>\n\n\n\n

    Platelet activating factor (PAF) and activity of its biosynthetic and catabolic enzymes in blood and leukocytes of male patients with newly diagnosed heart failure
    Authors: <\/strong>Detopoulou P, Nomikos T, Fragopoulou E, Antonopoulou S, Kotroyiannis I, Vassiliadou C, Panagiotakos DB, Chrysohoou C, Pitsavos C, Stefanadis C.
    Journal: <\/strong>Clin Biochem (2009): 44<\/p>\n\n\n\n

    Protective effect of stilbenes containing extract-fraction from Cajanus cajan L. on Abeta(25-35)-induced cognitive deficits in mice
    Authors: <\/strong>Ruan CJ, Si JY, Zhang L, Chen DH, Du GH, Su L.
    Journal: <\/strong>Neurosci Lett (2009): 159<\/p>\n\n\n\n

    Platelet-activating factor acetylhydrolase and transacetylase activities in human aorta and mammary artery
    Authors: <\/strong>Tsoukatos DC, Brocheriou I, Moussis V, Panopoulou CP, Christofidou ED, Koussissis S, Sismanidis S, Ninio E, Siminelakis S.
    Journal: <\/strong>J Lipid Res (2008): 2240<\/p>\n\n\n\n

    Ver todas las 41 referencias: <\/em>Citation Explorer<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
    Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
    Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a>
    Design of potent inhibitors of acetylcholinesterase using morin as the starting compound<\/a>
    Dietary and donepezil modulation of mTOR signaling and neuroinflammation in the brain<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Kit de ensayo colorim\u00e9trico de acetilcolinesterasa, Amplite\u00ae Este kit de ensayo colorim\u00e9trico de acetilcolinesterasa proporciona un m\u00e9todo conveniente para detectar la actividad de AChE.<\/p>\n","protected":false},"featured_media":2916,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2910"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":12,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2910\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3614,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2910\/revisions\/3614"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/2916"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=2910"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=2910"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}