{"id":2882,"date":"2023-01-06T12:46:55","date_gmt":"2023-01-06T18:46:55","guid":{"rendered":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/?post_type=al_product&p=2882"},"modified":"2023-01-20T17:01:55","modified_gmt":"2023-01-20T23:01:55","slug":"amplite-choline-quantitation-kit","status":"publish","type":"al_product","link":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/productos\/amplite-choline-quantitation-kit\/","title":{"rendered":"Amplite\u00ae Choline Quantitation Kit"},"content":{"rendered":"\n

La colina y sus metabolitos juegan un papel importante en la integridad estructural y la se\u00f1alizaci\u00f3n de las membranas celulares y la neurotransmisi\u00f3n colin\u00e9rgica (s\u00edntesis de acetilcolina). Es una fuente importante de grupos metilo a trav\u00e9s de su metabolito, la trimetilglicina, que participa en las v\u00edas de s\u00edntesis de S-adenosilmetionina. La deficiencia de colina puede causar enfermedad hep\u00e1tica, aterosclerosis y posiblemente trastornos neurol\u00f3gicos. A pesar de su importancia en el sistema nervioso central como precursor de la acetilcolina y la fosfatidilcolina de membrana, el papel de la colina en las enfermedades mentales ha sido poco estudiado. <\/p>\n\n\n\n

Este kit de cuantificaci\u00f3n de colina Amplite\u00ae proporciona uno de los m\u00e9todos m\u00e1s sensibles para cuantificar la colina. El kit utiliza Amplite\u00ae Red para cuantificar la concentraci\u00f3n de colina, que est\u00e1 relacionada con la producci\u00f3n de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno en las reacciones de acoplamiento enzim\u00e1tico mediadas por colina oxidasa. La cantidad de colina es proporcional a la concentraci\u00f3n de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno formado en el ciclo de reacci\u00f3n de acoplamiento enzim\u00e1tico. En presencia de peroxidasa, la intensidad de fluorescencia de Amplite\u00ae Red es proporcional a la formaci\u00f3n de per\u00f3xido de hidr\u00f3geno que se convierte en la concentraci\u00f3n de colina. <\/p>\n\n\n\n

El ensayo se puede leer f\u00e1cilmente con un lector de microplacas de fluorescencia. Como alternativa, el ensayo tambi\u00e9n se puede leer a ~570 nm con un lector de microplacas de absorci\u00f3n.<\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n
Catalogo<\/th>Producto<\/th>Presentaci\u00f3n<\/th><\/tr><\/thead>
AAT-40007<\/td>Amplite\u00ae Choline Quantitation Kit<\/td>200 ensayos<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n
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\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

SDS<\/a><\/p>\n\n\n\n

\"pdf\"\/<\/figure>\n\n\n\n

Protocol<\/a><\/p>\n<\/div>\n\n\n\n

Importante: Solo para uso en investigaci\u00f3n (RUO). <\/p>\n\n\n\n

<\/div>\n\n\n\n

Plataforma<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Lector de Microplacas de Fluorescencia<\/mark> <\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n<\/td>540 nm<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n<\/td>590 nm<\/td><\/tr>
Cutoff<\/td>570 nm<\/td><\/tr>
Placa recomendada<\/td>Negro s\u00f3lido<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Componentes<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Component A: Amplite\u2122 Red<\/td>1 vial<\/td><\/tr>
Component B: Choline Probe<\/td>2 bottles (polvo liofilizado)<\/td><\/tr>
Component C: Choline Standard<\/td>1 vial (2.8 mg)<\/td><\/tr>
Component D: Buffer de ensayo<\/td>1 botella (25 mL)<\/td><\/tr>
Component E: DMSO<\/td>1 vial (100 \u00b5L)<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Espectro<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Abrir en Advanced Spectrum Viewer<\/a><\/em><\/p>\n\n\n\n

\"\"<\/figure>\n\n\n\n

Propiedades espectrales<\/mark><\/p>\n\n\n\n

Excitaci\u00f3n (nm)<\/td>571<\/td><\/tr>
Emisi\u00f3n (nm)<\/td>584<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
<\/div>\n\n\n\n

Preparaci\u00f3n de Soluciones de Stock<\/p>\n\n\n\n

A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20 \u00b0C despu\u00e9s de la preparaci\u00f3n. Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n.<\/em><\/p>\n\n\n\n

  1. Soluci\u00f3n madre de Amplite\u2122 Red (250X):<\/em>
    Agregue 40 \u00b5L de DMSO (Componente E) en el vial de sustrato Amplite\u2122 Red (Componente A). La soluci\u00f3n madre debe usarse con prontitud. Cualquier soluci\u00f3n restante se debe dividir en al\u00edcuotas y volver a congelar a -20 o<\/sup>C. Nota: Evite los ciclos repetidos de congelaci\u00f3n y descongelaci\u00f3n. Nota: El sustrato Amplite\u2122 Red es inestable en presencia de tioles como ditiotreitol (DTT) y 2-mercaptoetanol. La concentraci\u00f3n final de DTT o 2-mercaptoetanol en la reacci\u00f3n no debe ser superior a 10 \u00b5M. El sustrato Amplite\u2122 Red tambi\u00e9n es inestable a un pH alto (> 8,5). Por lo tanto, la reacci\u00f3n debe realizarse a pH 7-8. Se recomienda el tamp\u00f3n de ensayo proporcionado (pH 7,4).<\/li>
  2. Soluci\u00f3n madre est\u00e1ndar de colina (50 mM):<\/em>
    Agregue 400 \u00b5L de ddH2O en el vial de Choline Standard (Componente C) y mezcle bien. Nota: La soluci\u00f3n madre de colina no utilizada debe dividirse en al\u00edcuotas de un solo uso y almacenarse a -20o<\/sup>C.<\/li><\/ol>\n\n\n\n
    \n\n\n\n

    Preparaci\u00f3n de Soluciones de Trabajo<\/p>\n\n\n\n

    Agregue 5 ml de buffer de ensayo (componente D) al frasco de sonda de colina (componente B) y m\u00e9zclelos bien. Agregue 20 \u00b5L de soluci\u00f3n madre Amplite Red\u2122 (250X) en la sonda de colina.<\/p>\n\n\n\n

    \n\n\n\n

    Preparacion de Solucion Estandar<\/p>\n\n\n\n

    Est\u00e1ndar de colina<\/em><\/p>\n\n\n\n

    Para mayor comodidad, utilice el Planificador de diluci\u00f3n en serie: https:\/\/www.aatbio.com\/tools\/serial-dilution\/40007<\/strong><\/a>
    Agregue 20 \u00b5L de soluci\u00f3n est\u00e1ndar de colina (50 mM) a 980 \u00b5L de buffer de ensayo (componente D) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de 1000 \u00b5M. Nota: La soluci\u00f3n est\u00e1ndar de colina diluida es inestable y debe usarse dentro de las primeras 4 horas. Lleve 30 \u00b5L de est\u00e1ndar de 1000 \u00b5M a 970 \u00b5L de buffer de ensayo (componente D) para generar una soluci\u00f3n est\u00e1ndar de colina de 30 \u00b5M y luego realice diluciones en serie 1:3 para obtener colina de 10, 3, 1, 0,3, 0,1, 0,03 y 0 \u00b5M est\u00e1ndar. (Consulte el enlace en la Preparaci\u00f3n de la soluci\u00f3n est\u00e1ndar)<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n
    \"\"<\/figure>\n\n\n\n

    Figura 1. <\/strong>La respuesta a la dosis de colina se obtuvo con el kit de cuantificaci\u00f3n de colina Amplite\u00ae en una placa negra s\u00f3lida de 96 pozos utilizando un lector de microplacas de fluorescencia Gemini (Molecular Devices). Se pueden detectar niveles tan bajos como 100 nM (10 picomoles\/pozo) de colina con un tiempo de incubaci\u00f3n de 30 minutos (n=3).<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Productos Relacionados<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Name<\/td>Excitation (nm)<\/td>Emission (nm)<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Ethanol Quantitation Kit<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr>
    Amplite\u00ae Cholesterol Quantitation Kit<\/a><\/td>571<\/td>584<\/td><\/tr><\/tbody><\/table><\/figure>\n\n\n\n
    <\/div>\n\n\n\n

    Bibliograf\u00eda<\/mark><\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Branched-chain amino acids govern the high learning ability phenotype in Tokai high avoider (THA) rats<\/a>
    Authors: <\/strong>Shida, Yukari and Endo, Hitoshi and Owada, Satoshi and Inagaki, Yutaka and Sumiyoshi, Hideaki and Kamiya, Akihide and Eto, Tomoo and Tatemichi, Masayuki
    Journal: <\/strong>Scientific reports (2021): 1–16<\/p>\n\n\n\n

    Regulation and function of 6-phosphofructo-2-kinase\/fructose-2, 6-bisphosphatase 3 in innate immune response to viral infection<\/a>
    Authors: <\/strong>Gold, Sarah Ruth
    Journal: <\/strong>(2020)<\/p>\n\n\n\n

    Structural snapshots of the catalytic cycle of the phosphodiesterase Autotaxin<\/a>
    Authors: <\/strong>Hausmann, Jens and Keune, Willem-Jan and Ederveen, Agnes L Hipgrave and van Zeijl, Leonie and Joosten, Robbie P and Perrakis, Anastassis
    Journal: <\/strong>Journal of structural biology (2016)<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Referencias<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    Real-time multiplex PCR assay for genotyping of three apolipoprotein E alleles and two choline acetyltransferase alleles with three hybridization probes
    Authors: <\/strong>Park HD, Park KU, Kim KW, Song J, Chang HE, Heo SR, Lee HJ, Kim JQ.
    Journal: <\/strong>Clin Chem Lab Med (2007): 346<\/p>\n\n\n\n

    [Methyl-3H]-choline incorporation into MCF-7 cells: correlation with proliferation, choline kinase and phospholipase D assay
    Authors: <\/strong>Al-Saeedi F, Smith T, Welch A.
    Journal: <\/strong>Anticancer Res (2007): 901<\/p>\n\n\n\n

    Rapid high-throughput detection of peroxide with an acridinium-9-carboxamide: a homogeneous chemiluminescent assay for plasma choline
    Authors: <\/strong>Adamczyk M, Brashear RJ, Mattingly PG.
    Journal: <\/strong>Bioorg Med Chem Lett (2006): 2407<\/p>\n\n\n\n

    A simple and rapid radiochemical choline acetyltransferase (ChAT) assay screening test
    Authors: <\/strong>Shiba K, Ogawa K, Kinuya S, Yajima K, Mori H.
    Journal: <\/strong>J Neurosci Methods (2006): 98<\/p>\n\n\n\n

    Comparison of different sperm detection methods: amplification of fragment 3 of amelogenin gene (AMY 3), acid phosphatase detection, microcristalline choline assay and microscopic examination
    Authors: <\/strong>Rydzewska MJ, Janica J, Pepinski W, Skawronska M, Niemcunowicz-Janica A.
    Journal: <\/strong>Rocz Akad Med Bialymst (2000): 63<\/p>\n\n\n\n

    Rapid assay of choline in foods using microwave hydrolysis and a choline biosensor
    Authors: <\/strong>Panfili G, Manzi P, Compagnone D, Scarciglia L, Palleschi G.
    Journal: <\/strong>J Agric Food Chem (2000): 3403<\/p>\n\n\n\n

    Establishment of an efficient enzyme-linked immunosorbent assay for the determination of human choline acetyltransferase
    Authors: <\/strong>Poethke R, Tumani H, Felgenhauer K, Mader M.
    Journal: <\/strong>J Neuroimmunol (1997): 206<\/p>\n\n\n\n

    Ion-exchange liquid chromatography method with indirect UV detection for the assay of choline in pharmaceutical preparations
    Authors: <\/strong>Leroy P, Barbaras M, Colin JL, Nicolas A.
    Journal: <\/strong>J Pharm Biomed Anal (1995): 581<\/p>\n\n\n\n

    Assay, Purification, and Partial Characterization of Choline Monooxygenase from Spinach
    Authors: <\/strong>Burnet M, Lafontaine PJ, Hanson AD.
    Journal: <\/strong>Plant Physiol (1995): 581<\/p>\n\n\n\n

    The identification of human semen by a chemiluminescent assay of choline
    Authors: <\/strong>Manabe F, Tsutsumi A, Yamamoto Y, Hashimoto Y, Ishizu H.
    Journal: <\/strong>Nihon Hoigaku Zasshi (1991): 205<\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n\n\n\n

    Application Notes (en Ingles)<\/mark><\/p>\n\n\n\n

    A Library of Well-Defined and Water-Soluble Poly(alkyl phosphonate)s with Adjustable Hydrolysis<\/a>
    Acetylcholinesterase Inhibitory Activity of Pigment Echinochrome A<\/a>
    Ameliorative Effect of Novel Vitamin Formula with Herbal Extracts on Scopolamine-Induced Alzheimer’s Disease<\/a>
    An Increase in Plasma Homovanillic Acid with Cocoa Extract Consumption Is Associated with the Alleviation of Depressive Symptoms in Overweight or Obese Adults<\/a>
    Attenuation of lysyl oxidase and collagen gene expression in keratoconus patient corneal epithelium corresponds to disease severity<\/a><\/p>\n\n\n\n

    <\/div>\n","protected":false},"excerpt":{"rendered":"

    Kit de cuantificaci\u00f3n de colina Amplite\u00ae Este kit de cuantificaci\u00f3n de colina Amplite\u00ae proporciona uno de los m\u00e9todos m\u00e1s sensibles para cuantificar la colina. <\/p>\n","protected":false},"featured_media":2886,"template":"","al_product-cat":[34],"aioseo_notices":[],"_links":{"self":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2882"}],"collection":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product"}],"about":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/types\/al_product"}],"version-history":[{"count":7,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2882\/revisions"}],"predecessor-version":[{"id":3622,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product\/2882\/revisions\/3622"}],"wp:featuredmedia":[{"embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media\/2886"}],"wp:attachment":[{"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/media?parent=2882"}],"wp:term":[{"taxonomy":"al_product-cat","embeddable":true,"href":"https:\/\/nuevo22.cidsamexico.com\/index.php\/wp-json\/wp\/v2\/al_product-cat?post=2882"}],"curies":[{"name":"wp","href":"https:\/\/api.w.org\/{rel}","templated":true}]}}