Proteina GPBAR1 (TGR5)

Descripción

Las proteínas de membrana son la clase de proteínas más relevante desde el punto de vista farmacéutico. Al mismo tiempo, es muy difícil obtenerlos en forma pura y activa. Los expertos en proteínas de Cube Biotech han trabajado arduamente para producir GPCR humanos con la calidad suficiente que ahora podemos ofrecer a la comunidad cientifica.

Nuestra primera proteína de membrana activa pura disponible es GPBAR1/TGR5, un GPCR humano involucrado en la homeostasis de los ácidos biliares, el metabolismo de la glucosa y el mantenimiento del peso. La proteína está disponible lista para usar, lista para estudios de unión de ligandos, cristalización y otros experimentos bioquímicos/biofísicos.

Catalogo	Producto	Presentación
CU-28101	Proteina GPBAR1 (TGR5)	10 ug
CU-28103	Proteina GPBAR1 (TGR5)	50 ug

Caracteristicas

Alternative names	GPBAR-1,TGR5, GPCR19, M-BAR, BG37
UniProt / UniGene	Q8TDU6 / 155918
Protein class	GPCR, class A (Rhodopsin-like receptors)
Organism	Human (Homo sapiens)
Sequence, explained	Full-length, wildtype sequence N-terminal HA signal sequence, 10x His-tag with spacer, HRV 3C protease site spacer, Rho1D4 tag
Sequence, One-Letter Code	MKTIIA LSYIFCLVFA MTPNSTGEVP SPIPKGALGL SLALASLIIT ANLLLALGIA WDRRLRSPPA GCFFLSLLLA GLLTGLALPT LPGLWNQSRR GYWSCLLVYL APNFSFLSLL ANLLLVHGER YMAVLRPLQP PGSIRLALLL TWAGPLLFAS LPALGWNHWT PGANCSSQAI FPAPYLYLEV YGLLLPAVGA AAFLSVRVLA TAHRQLQDIC RLERAVCRDE PSALARALTW RQARAQAGAM LLFGLCWGPY VATLLLSVLA YEQRPPLGPG TLLSLLSLGS ASAAAVPVAM GLGDQRYTAP WRAAAQRCLQ GLWGRASRDS PGPSIAYHPS SQSSVDLDLN GGHHHHHHHH HHLEVLFQGP GSSGTETSQV APA
Affinity tags	His-tag and Rho1D4-tag (both C-terminal)
Expression Host	SF9 (baculovirus)
Size (excluding additional elements)	379 (330) amino acids 40,606 (35,248) Da
Buffer composition	0 mM NaCl, 20 mM NaH2PO4 pH 7.4, 0.1% Foscholine-12, 0.01% cholesterolhemisuccinate (CHS)
Purity	>98%, determined via SDS-PAGE
Homogeneity	Size exclusion chromatography
Activity	Ligand binding measured by SPR using Taurolithocholic Acid Sulfate Disodium Salt (CAS 64936-83-0) at 10°C. Using a 1:1 binding model, the dissociation constant (Kd) was determined to be 1.1x10e-8 M.
Function	Receptor for bile acid. Bile acid-binding induces its internalization, activation of extracellular signal-regulated kinase and intracellular cAMP production. May be involved in the suppression of macrophage functions by bile acids, and in modulating inflammation.
Literature references	Kawamata, Yuji, et al. “AG protein-coupled receptor responsive to bile acids.” Journal of Biological Chemistry 278.11 (2003): 9435-9440.

Preparación

Expression system: Sf9 (Baculovirus)
Purification: PureCube Rho1D4 Agarose, Size exclusion chromatography
Buffer: 100 mM NaCl, 20 mM NaH2PO4 pH 7.4, 0.1% Foscholine-12, 0.01% cholesterolhemisuccinate CHS)
Form: Liquid

Control de Calidad
Pureza: (SDS-PAGE): >98%, ver Fig. 1
Homogeneidad: Tamaño exclusión a cromatografía
Actividad: Unión del ligando medida por resonancia de plasmón superficial (SPR=
usando sal disódica de sulfato de ácido taurolitocólico (CAS 64936-83-0)
Utilizando un modelo de unión 1:1, se determinó la constante de disociación (Kd) para
ser 1,1 x 10-8 M (Fig.2).

Aplicaciones
• SDS-PAGE
• Western Blot
• Protein Crystallization
• Biochemical and biophysical analyses

• Ligand binding assays (e.g. SPR)

Envio y Almacenamiento

Este producto se envia en hielo seco y se almacena a -80°C. Evitar los ciclos de congelación y descongelación.

Imagenes

Descargo de responsabilidad: Nuestros productos están destinados para investigacion en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad.