Multidrug Resistance Activity Kit
Descripción
El kit de actividad de resistencia a múltiples fármacos (MDR) de ION es una solución eficaz para detectar la actividad de MDR1 y MRP1 y los compuestos susceptibles al flujo de salida mediado por MDR. Este kit de actividad MDR de ION es compatible con microscopía de fluorescencia, citometría de flujo y lectores de placas de fluorescencia que utilizan configuraciones FITC/GFP.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| ON-3330 | Multidrug Resistance Activity Kit | Kit |
Componentes del Kit
– 4 mM Calcein AM en DMSO, 50 μL (2)
– 1000X Cyclosporine A en Etanol, 50 μL
– 1X Assay Buffer, pH 7.3, 100 mL
– TRS, 4 mL
Especificaciones
| Excitación | 495nm  |
| Emisión | 515nm  |
Un ensayo fluorométrico para detectar amplios rangos de sustratos MDR y efectores.
La calceína AM es un colorante no fluorescente que atraviesa la membrana y que penetra en las células de forma pasiva. Una vez dentro del citosol de las células, las esterasas intracelulares lo convierten en calceína fluorescente (Ex/Em: 495 nm/515 nm), lo que da como resultado una fluorescencia citosólica uniforme. Los transportadores de salida de fármacos, como la glicoproteína P (Pgp, MDR1) y la proteína asociada a la resistencia a múltiples fármacos (MRP1), expulsan activamente la calceína AM del interior de la célula antes de que las esterasas puedan convertirla en calceína. La presencia de sustratos de MDR adicionales o inhibidores de la expresión de MDR da como resultado una disminución del flujo de salida de calceína AM, lo que provoca un aumento medible en la fluorescencia intracelular. Además de identificar sustratos e inhibidores de MDR, este kit también se puede utilizar para evaluar la actividad de los transportadores de MDR en las células.
Al seguir nuestro protocolo, el kit de actividad MDR de ION proporciona suficientes reactivos para preparar 100 ml de solución de trabajo, suficiente para diez placas de 96 o 384 pocillos u 80 muestras de citometría de flujo. El número real de ensayos variará según las concentraciones de tinte óptimas para su aplicación.
Referencias
Eilers M, et. al. MRP (ABCC) transporters-mediated efflux of anti-HIV drugs, saquinavir, and zidovudine, from human endothelial cells. Exp Biol Med (Maywood). (2008). 233(9).
Jakab K, et. al. Application of flow cytometry immunophenotyping and multidrug resistance assay in B-cell acute lymphoid leukemia and multiple myeloma. Neoplasma. (2005). 52(1).
Legrand O, et. al. Pgp and MRP Activities Using Calcein-AM Are Prognostic Factors in Adult Acute Myeloid Leukemia Patients. Blood. (1998). 91(12).
Ansbro MR, et. al. Screening compounds with a novel high-throughput ABCB1-mediated efflux assay identifies drugs with known therapeutic targets at risk for multidrug resistance interference. PLoS One. (2013). 8(4).
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