Descripción
Se han utilizado una variedad de colorantes de cianina 5 (Cy5®) para marcar moléculas biológicas para imágenes de fluorescencia y otros análisis bioquímicos basados en fluorescencia. Se utilizan ampliamente para marcar péptidos, proteínas y oligos, etc. Los tintes Cy5® son un tipo de fluoróforos rojos más comunes. Estos fluoróforos versátiles pueden tolerar un rango de pH de 3 a 10 para su uso en una variedad de aplicaciones a pH biológicamente relevantes. Los tintes también son tolerantes a DMSO y fotoestables para permitir la transferencia desde el almacenamiento hasta el ensayo sin pérdida de rendimiento. La solubilidad acuosa elimina la necesidad de disolventes orgánicos en los buffers de ensayo.
Nuestros Cy5® Fluors se someten a pruebas de control de calidad exhaustivas para garantizar altos niveles de cromóforo y contenido de colorante reactivo. Los tintes monorreactivos son adecuados para el etiquetado preciso y dirigido de proteínas y oligonucleótidos, y los tintes bioreactivos son más adecuados para el etiquetado general. Se recomiendan colorantes de éster NHS para marcar grupos amina y colorantes de maleimida para marcar grupos tiol.
Este éster Cy5® NHS reacciona fácilmente con grupos amino. AAT Bioquest ofrece ésteres de colorante Cy NHS en forma de sales de trietilamonio que son más solubles en DMSO y DMF que las sales de potasio correspondientes que ofrecen otros proveedores. Las sales de trietilamonio del tinte Cy tienen la misma reactividad y dan los conjugados idénticos a las sales de potasio del tinte Cy. Cy5® es la marca comercial de GE Healthcare
Catalogo | Producto | Presentacion |
---|---|---|
AAT-151 | Cyanine 5 monosuccinimidyl ester | 1mg |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO). Almacenamiento: Congelación (< -15 °C). Minimizar la exposición a la luz.
Propedades Fisicas
Peso Molecular | 855.07 |
Disolvente | DMSO |
Espectro
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Propiedades Espectrales
Factor de corrección (260 nm) | 0.02 |
Factor de corrección (280 nm) | 0.03 |
Factor de corrección (482 nm) | 0.009 |
Factor de corrección (565 nm) | 0.09 |
Coeficiente de Extinción (cm -1 M -1) | 2500001 |
Excitación (nm) | 651 |
Emisión (nm) | 670 |
Rendimiento Cuántico | 0.272, 0.41 |
Preparación de la solución de stock común
Volumen de DMSO necesario para reconstituir la masa específica del éster monosuccinimidíli de cianina 5 [equivalente al éster Cy5® NHS] a la concentración dada. Tenga en cuenta que el volumen es solo para preparar la solución madre. Consulte el protocolo experimental de muestra para conocer los buffers experimentales/fisiológicos apropiados.
0.1 mg | 0.5 mg | 1 mg | 5 mg | 10 mg | |
1 mM | 116.949 µL | 584.747 µL | 1.169 mL | 5.847 mL | 11.695 mL |
5 mM | 23.39 µL | 116.949 µL | 233.899 µL | 1.169 mL | 2.339 mL |
10 mM | 11.695 µL | 58.475 µL | 116.949 µL | 584.747 µL | 1.169 mL |
Imagenes
Figura 1. Las células HeLa se incubaron con (Tubulin+) o sin (Tubulin-) anti-tubulina de ratón seguido de conjugado de IgG anti-ratón de cabra Cy5® de AAT (rojo, izquierda) o conjugado de IgG anti-ratón de cabra Cy5® de Jackson (rojo, izquierda). derecha), respectivamente. Los núcleos celulares se tiñeron con Hoechst 33342 (Blue, Cat# 17530).
Figure 2. Estructura Quimica de Cyanine 5 monosuccinimidyl ester [equivalente a Cy5® NHS ester]
Productos Similares
Name | Excitation (nm) | Emission (nm) | Extinction coefficient (cm -1 M -1) | Quantum yield | Correction Factor (260 nm) | Correction Factor (280 nm) | Correction Factor (482 nm) | Correction Factor (565 nm) |
Cyanine 3 monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy3® NHS ester] | 555 | 569 | 1500001 | 0.151 | 0.07 | 0.073 | – | – |
Cyanine 5 bissuccinimidyl ester [equivalent to Cy5® bisNHS ester] | 651 | 670 | 2500001 | 0.271, 0.42 | 0.02 | 0.03 | 0.009 | 0.09 |
Cyanine 7 monosuccinimidyl ester [equivalent to Cy7® NHS ester] | 756 | 779 | 250000 | 0.3 | 0.05 | 0.036 | 0.0005 | 0.0193 |
Bibliografía
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Referencias
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Application Notes (en Ingles)
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Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
Bright Tide Fluor™-Based Fluorescent Peptides and Their Applications In Drug Discovery and Disease Diagnosis
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Fluorescein isothiocyanate (FITC)