Kit de ensayo JC-10 de potencial de membrana mitocondrial Cell Meter™, *Optimizado para ensayos de citometría de flujo*. Este ensayo fluorométrico se basa en la detección de cambios en el potencial de la membrana mitocondrial en las células mediante el tinte catiónico lipofílico JC-10.
Descripción
Aunque JC-1 se usa ampliamente en muchos laboratorios, su poca solubilidad en agua causa inconvenientes extraordinarios. Incluso a una concentración de 1 µM, JC-1 tiende a precipitar en un buffer acuoso. JC-10 está desarrollado para ser una alternativa superior a JC-1 donde se desea una alta concentración de colorante.
En comparación con JC-1, JC-10 tiene una mejor solubilidad en agua . JC-10 es capaz de entrar selectivamente en las mitocondrias y cambia reversiblemente su color de verde a naranja a medida que aumentan los potenciales de membrana. Esta propiedad se debe a la formación reversible de agregados JC-10 tras la polarización de la membrana que provoca cambios en la luz emitida de 520 nm (es decir, emisión de forma monomérica JC-10) a 570 nm (es decir, emisión de agregado J). Cuando se excita a 490 nm, el color de JC-10 cambia reversiblemente de verde a naranja verdoso a medida que la membrana mitocondrial se vuelve más polarizada. Ambos colores se pueden detectar utilizando los filtros montados comúnmente en todos los citómetros de flujo, de modo que se puede analizar la emisión verde en el canal de fluorescencia 1 (FL1) y la emisión naranja verdosa en el canal 2 (FL2). Además de su uso potencial en citometría de flujo, también se puede utilizar en imágenes de fluorescencia y plataforma de microplaca de fluorescencia.
Este kit proporciona todos los componentes esenciales con un método de ensayo optimizado para la detección de apoptosis en células con pérdida del potencial de membrana mitocondrial. Este ensayo fluorométrico se basa en la detección de cambios en el potencial de la membrana mitocondrial en las células mediante el tinte catiónico lipofílico JC-10. En células normales, JC-10 se concentra en la matriz mitocondrial donde forma agregados rojos fluorescentes. Sin embargo, en células apoptóticas y necróticas, JC-10 existe en forma monomérica y tiñe las células con fluorescencia verde. El kit está optimizado para la detección de activadores e inhibidores de la apoptosis mediante citometría de flujo. También ofrecemos un práctico kit de formato de placa de microtitulación de fluorescencia de 96 y 384 pozos (Cat. No. 22800) para la detección de alto rendimiento.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22801 | Cell Meter™ JC-10 Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit *Optimized for Microplate Assays* | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Citómetro de Flujo
| Excitación laser | 488 nm |
| Emisión filtro | 530/30 nm, 575/26 nm |
| Especificaciones Instrumento | Canal FITC, PE |
Componentes
| Componente A: 200X JC-10 in DMSO | 1 vial (250 µL) |
| Componente B: Buffer de ensayo | 1 botella (50 mL) |
Espectro
Abrir en Advanced Spectrum Viewer
Propiedades Espectrales
| Excitación (nm) | 508 |
| Emisión (nm) | 524 |
PREPARACION DE SOLUCION DE TRABAJO
Agregue 50 µl de 200X JC-10 (componente A) en 5 ml de buffer de ensayo (componente B) y mezcle bien para preparar la solución de trabajo con colorantes JC-10. Proteger de la luz.
Para guias sobre la preparación de muestras de células, visite
https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
Imagen
Figura 1. Efecto del cambio de potencial de membrana mitocondrial inducido por FCCP en células Jurkat. Las células Jurkat se cargaron con colorante JC-10 junto con DMSO (superior) o FCCP 5 µM (inferior) durante 10 minutos. Las intensidades de fluorescencia tanto para los agregados J como para las formas monoméricas de JC-10 se midieron con un citómetro de flujo FACSCalibur (Becton Dickinson) usando canales FL1 y FL2. Los datos no compensados (columna izquierda) se compararon con los datos compensados (columna derecha).
Producto Alternativo
Cell Meter™ JC-10 Mitochondrion Membrane Potential Assay Kit *Optimized for Microplate Assays*
Productos Relacionados
Bibliografías
Ver todas las 58 bibliografías: Citation Explorer
Impact of Organelle Transport Deficits on Mitophagy and Autophagy in Niemann–Pick Disease Type C
Authors: Liedtke, Maik and V{\”o}lkner, Christin and Hermann, Andreas and Frech, Moritz J
Journal: Cells (2022): 507
Mitochondria Transfer from Adipose Stem Cells Improves the Developmental Potential of Cryopreserved Oocytes
Authors: Kankanam Gamage, Udayanga Sanath and Hashimoto, Shu and Miyamoto, Yuki and Nakano, Tatsuya and Yamanaka, Masaya and Koike, Akiko and Satoh, Manabu and Morimoto, Yoshiharu
Journal: Biomolecules (2022): 1008
Patchouli alcohol suppresses castration-resistant prostate cancer progression by inhibiting NF-$\kappa$B signal pathways
Authors: Cai, Jian and Zhao, Juan and Gao, Ping and Xia, Yuguo
Journal: Translational Andrology and Urology (2022): 528
A comparative study of metformin and nicotinamide riboside in alleviating tissue aging in rats
Authors: Geng, Lingling and Zhang, Bin and Liu, Haisong and Wang, Si and Cai, Yusheng and Yang, Kuan and Zou, Zhiran and Jiang, Xiaoyu and Liu, Zunpeng and Li, Wei and others,
Journal: Life Medicine (2022)
DNA repair proteins as the targets for paroxetine to induce cytotoxicity in gastric cancer cell AGS
Authors: Liu, Bang-Hung and Yuan, Tein-Ming and Huang, Chih-Jou and Hsu, Duan-Ting and Chen, Shi-Wen and Hsiao, Nai-Wan and Lin, Sheng-Chih and Wu, Shu-Wan and Lin, Yi-Mei J and Chuang, Show-Mei
Journal: American journal of cancer research (2022): 1465
Effects of time-restricted feeding and type of food on fertility competence in female mice
Authors: Konishi, Nafuko and Matsumoto, Hiroshi and Hashimoto, Shu and Gamage, Udayanga Sanath Kankanam and Tachibana, Daisuke and Fukuda, Aisaku and Morimoto, Yoshiharu and Koyama, Masayasu
Journal: Scientific Reports (2022): 1–15
The relationship between free fatty acids and mitochondrial oxidative stress damage to trophoblast cell in preeclampsia
Authors: Jiang, Lingling and Yan, Jianying
Journal: BMC Pregnancy and Childbirth (2022): 1–6
Gracillin Isolated from Reineckia carnea Induces Apoptosis of A549 Cells via the Mitochondrial Pathway
Authors: Yang, Jianqiong and Cao, Ling and Li, Yamei and Liu, Hai and Zhang, Minhong and Ma, Huamou and Wang, Biao and Yuan, Xiaoliang and Liu, Qian
Journal: Drug design, development and therapy (2021): 233
Mitochondrial Function and Root-Filled Teeth–Detrimental and Unknown Interfaces in Systemic Immune Diseases
Authors: Lechner, Johann and Mayer, Wolfgang
Journal: International Journal of General Medicine (2020): 387–402
Inhibition of phosphodiesterase-10A by Papaverine protects human cortical neurons from quinolinic acid induced oxidative stress and synaptic proteins alterations
Authors: Bhat, Abid and Tan, Vanessa and Heng, Benjamin and Essa, Musthafa M and Chidambaram, Saravana B and Guillemin, Gilles J
Journal: bioRxiv (2020)
Application Notes (en Ingles)
A Novel Fluorescent Probe for Imaging and Detecting Hydroxyl Radical in Living Cells
Abbreviation of Common Chemical Compounds Related to Peptides
Annexin V
Bright Tide Fluor™-Based Fluorescent Peptides and Their Applications In Drug Discovery and Disease Diagnosis
Calcein