Kit de ensayo de GSH intracelular Cell Meter™ *Optimizado para citometría de flujo con excitación de 405 nm*
Descripción
Hay una variedad de parámetros que se pueden usar para monitorear la apoptosis celular. Este kit en particular está diseñado para detectar la apoptosis celular midiendo la disminución del glutatión reducido (GSH). GSH es importante para mantener el nivel redox de las células. Está involucrado en muchos procesos celulares, incluida la eliminación de radicales libres, la desintoxicación de fármacos, la señalización celular y la proliferación celular. La disminución en la concentración celular de GSH es un sello distintivo temprano en la progresión de la muerte celular en respuesta a diferentes estímulos apoptóticos en muchas células.
Nuestro kit de ensayo de GSH intracelular Cell Meter™ utiliza nuestro patentado ThiolTrace™ Violet 500, que se vuelve fuertemente fluorescente al reaccionar con el tiol (incluido el GSH en las células). En las células normales, la sonda es muy fluorescente, mientras que en las células apoptóticas, la intensidad de la tinción disminuye. Las células teñidas con ThiolTrace™ Violet se pueden visualizar con un citómetro de flujo (juego de filtros Pacific Orange). El kit se puede utilizar junto con otros reactivos, como 7-AAD (Cat. 17501) para el estudio multiparamétrico de la viabilidad celular y la apoptosis.
El kit está optimizado para la detección de activadores e inhibidores de la apoptosis con un citómetro de flujo.
| Catalogo | Producto | Presentación |
|---|---|---|
| AAT-22809 | Cell Meter™ Intracellular GSH Assay Kit *Optimized for Flow Cytometry with 405 nm excitation* | 100 pruebas |
Importante: Solo para uso en investigación (RUO).
Plataforma
Citómetro de Flujo
| Excitación | 405 nm laser |
| Emisión | 525/50 nm filtro |
| Instrucciones instrumento | Canal Pacific Orange |
Componentes
| Componente A: ThiolTrace™ Violet 500 | 1 vial |
| Componente B: Buffer de Ensayo | 1 botella (100 mL) |
| Componente C: DMSO | 1 vial (200 µL) |
Espectro
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Propiedades espectrales
| Exitación | 415 |
| Emisión | 499 |
Preparación de solución de Stock
A menos que se indique lo contrario, todas las soluciones madre no utilizadas deben dividirse en alícuotas de un solo uso y almacenarse a -20 °C después de la preparación. Evite los ciclos repetidos de congelación y descongelación.
Solución madre de ThiolTraceTM Violet 500 (500X):
Agregue 200 µL de DMSO (Componente C) en el vial de ThiolTraceTM Violet 500 y mezcle bien. Nota: Haga una alícuota y almacene la solución madre de ThiolTraceTM Violet 500 sin usar a -20 oC. Evite los ciclos repetidos de congelación/descongelación.
Para conocer guias sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
Preparación de solución de trabajo
Solución de trabajo ThiolTraceTM Violet 500 (1X):
Agregue 2 µL de solución madre de ThiolTraceTM Violet 500 en 1 mL de buffer de ensayo (componente B) o el buffer de su elección y mezcle bien. Nota: La solución de trabajo de ThiolTraceTM Violet 500 se puede preparar en el medio de cultivo celular que contiene suero.
Para conocer guias sobre la preparación de muestras de células, visite: https://www.aatbio.com/resources/guides/cell-sample-preparation.html
Imagen
Figura 1. La disminución de la intensidad de fluorescencia de ThiolTrace™ Violet 500 con la adición de campotecina en células HL-60. Las células HL-60 se trataron durante 6 horas sin (línea roja) o con campotecina 20 μM (línea verde) en una incubadora de CO2 a 37oC, al 5 % y luego se tiñeron con ThiolTrace™ Violet 500 durante 20 minutos. La intensidad de la fluorescencia se midió utilizando un citómetro de flujo ACEA NovoCyte 3000 con canal Pacific Orange.
Formatos alternativos
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