El talio se puede utilizar como ion sustituto para medir la actividad de los canales y transportadores de potasio y sodio.
Indicadores y Ensayos
El sodio (Na⁺) y el potasio (K⁺) son los dos cationes metálicos monovalentes más importantes desde el punto de vista fisiológico. Los transportadores y canales iónicos para Na⁺ y K⁺ se encuentran en cada célula de cada organismo conocido y son críticos para la vida. Si bien los medicamentos dirigidos a estos canales y transportadores se usan para tratar indicaciones que van desde la diabetes tipo II hasta la epilepsia y la presión arterial, el potencial terapéutico de este conjunto increíblemente diverso de proteínas sigue siendo en gran parte desconocido. Por lo tanto, los ensayos de canales iónicos son esenciales para promover el rápido descubrimiento y evaluación de canales y transportadores de cationes monovalentes como objetivos terapéuticos potenciales.
Si bien los indicadores fluorescentes sensibles al sodio y al potasio líderes en su clase de ION son excelentes herramientas para estudiar la dinámica celular de Na⁺ y K⁺, los cambios relativamente pequeños en las concentraciones intracelulares de Na⁺ y K⁺ en condiciones fisiológicas normales pueden hacer que Na⁺ y K⁺ Indicadores difíciles de usar, particularmente para aplicaciones de detección de alto rendimiento (HTS). En muchos casos, el ensayo de flujo de talio ofrece una excelente alternativa a los indicadores fluorescentes de potasio y sodio.
El ensayo de flujo de talio aprovecha un indicador fluorescente selectivo de Tl⁺, Thallos, y el hecho de que los canales y transportadores de potasio, así como los canales y transportadores de sodio, aceptan fácilmente Tl⁺ como catión sustituto. Cuando se agrega Tl⁺ al exterior de las células cargadas con Thallos, la entrada de Tl⁺ en las células a través de canales iónicos y transportadores permeables a Na⁺ o K⁺ da como resultado un aumento espectacular de la fluorescencia. Aunque el ensayo de flujo Tl+ es el más comúnmente asociado con HTS de canales de potasio, es igualmente adecuado para HTS de canales de sodio y transportadores de sodio, así como canales de cationes monovalentes no selectivos.
Formas y formatos de indicadores de talio
Thallos es un fluorocromo sintético pequeño que incorpora un resto de unión a Tl⁺ con excelente selectividad para Tl⁺ sobre la mayoría de los otros cationes metálicos fisiológicamente relevantes (p. ej., Ca²⁺). En condiciones en las que no se une Tl⁺, la fluorescencia del sensor se extingue significativamente. Cuando se une Tl⁺, se alivia la extinción y la fluorescencia del sensor aumenta drásticamente.
Thallos es compatible con una amplia variedad de detectores, incluidos microscopios fluorescentes, lectores de placas y citómetros de flujo. Durante los últimos 20 años, desde que el Dr. David Weaver inventó el ensayo de flujo Tl⁺, los indicadores sensibles a Tl⁺ han encontrado numerosos usos, incluido el cribado de alto rendimiento (HTS) del canal de potasio, el canal de sodio, otros canales de cationes monovalentes, algunos canales de cationes monovalentes transportadores y la clase Gi/o de receptores acoplados a proteína G (GPCR).
Además del tinte, también ofrecemos una selección de kits de ensayo de talio brillante con reactivos empaquetados individualmente para brindarle la máxima flexibilidad para optimizar sus ensayos de canales iónicos. Nuestro ensayo Brilliant Thallium Snapshot está diseñado para hacer que los ensayos de flujo de talio sean más accesibles, lo que le permite ejecutar pantallas de canales de iones funcionales sin automatización y en instrumentos fácilmente disponibles con capacidad de fluorescencia.
Thallos
(EX 490 nm, EM 515 nm) El mejor indicador fluorescente sensible a Tl⁺ de su clase. Cuenta con una excelente carga de células y una excelente compatibilidad con una amplia variedad de detectores, incluidos microscopios fluorescentes, lectores de placas y citómetros de flujo que utilizan filtros FITC de filtro comúnmente disponibles.
Brilliant Thallium Gold
(EX 530 nm, EM 550 nm) Brilliant Thallium Gold incluye Thallos Gold, el indicador de talio fluorescente de oro (Tl⁺) de ION. La excitación y la emisión desplazadas al rojo permiten la multiplexación con células que expresan GFP u otros indicadores fluorescentes verdes. Útil para ensayos de canales de potasio basados en fluorescencia y para estudiar una amplia variedad de canales de cationes monovalentes (canales de sodio), transportadores y GPCR. 10 placas.
Brilliant Thallium Gold Snapshot
Solución de ensayo compatible con múltiples instrumentos para mediciones de alto rendimiento basadas en placas de pocillos del flujo de talio (Tl⁺) a través de canales de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y no selectivos, así como algo de Na⁺ o transportadores de K⁺. Nuestra tecnología Snapshot pendiente de patente genera una señal de larga duración para que pueda detectar y cuantificar fácilmente los cambios en el canal iónico o la actividad del transportador en la mayoría de los instrumentos con capacidad de fluorescencia. La inclusión de Thallos Gold AM, nuestro indicador de talio desplazado hacia el rojo, convierte a este kit en la opción ideal cuando se utilizan células que expresan GFP para realizar ensayos de canales de potasio.
Brilliant Thallium Flex
(EX 490 nm, EM 515 nm) Ensayo de talio (Tl⁺) de alto rendimiento, sin lavado. La solución más flexible para medir la actividad de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y canales catiónicos no selectivos y sus efectores, incluidos transportadores y GPCR. 10 platos
Brilliant Thallium Snapshot
Ensayo Snapshot de alto rendimiento, sin lavado con talio (Tl⁺). Una adaptación del ensayo de flujo de talio diseñada para funcionar con lectores de placas estándar, microscopios, citómetros de flujo y más, para medir el flujo a través de canales de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y no selectivos y sus efectores, incluidos transportadores y GPCR . 10 platos
Flow Cytometric Potassium Channel Assay
La primera solución de ensayo para mediciones unicelulares de alto rendimiento de la actividad del canal de potasio (K⁺). Impulsada por nuestra tecnología de ensayo Snapshot pendiente de patente, la modulación del canal iónico genera una señal de larga duración para que pueda detectar y cuantificar fácilmente los cambios en el canal iónico o la actividad del transportador mediante la citometría de flujo. Este kit también puede funcionar para canales de sodio (Na⁺), canales de cationes no selectivos y algunos transportadores de Na⁺ o K⁺. 200 ensayos
Ensayos de canales de potasio y sodio utilizando flujo de talio
Ésteres del grupo acetoximetilo (AM) permeables a las células
La forma nativa de Thallos tiene carga negativa y es impermeable a la membrana. Sin embargo, enmascarar la carga negativa utilizando fracciones unidas a ésteres no polares (ésteres AM) permite que las moléculas entren en las células a través de la difusión pasiva. Una vez dentro de la célula, las enzimas esterasas intracelulares ubicuas promueven la hidrólisis rápida de los ésteres de AM, dejando la forma activa altamente polar del indicador atrapada dentro de la célula.
Reactivos para mejorar la carga, retención y supresión de fondo del indicador
Aunque la forma AM del indicador Thallos atraviesa fácilmente la membrana plasmática, existen otros factores que pueden afectar la eficacia con la que se carga Thallos en las células. Debido a que Thallos-AM es bastante hidrofóbico, es común usar el tensioactivo no iónico, Pluronic F-127, para mejorar su solubilidad en solución acuosa, mejorando así su carga en las células. Pluronic F-127 a las concentraciones empleadas para cargar indicadores en las células generalmente se tolera bien. Si bien Pluronic F-127 no es absolutamente esencial para cargar Thallos en las celdas, es muy recomendable.
Otro factor que puede afectar la carga celular y la localización intracelular es la presencia de proteínas de transporte capaces de transportar muchos indicadores fluorescentes sensibles a iones. En muchos tipos de células, la actividad de estos transportadores puede dar como resultado la compartimentación de los indicadores en compartimentos intracelulares así como la extrusión de los indicadores fuera de la célula. Ambos procesos pueden reducir drásticamente los niveles de señal a fondo y, en algunos tipos de células (p. ej., células CHO), hacen que la carga adecuada de indicadores fluorescentes selectivos de Tl⁺ sea casi imposible. Afortunadamente, los inhibidores de estas proteínas de transporte pueden ser un medio eficaz para mejorar la localización citoplasmática y la retención del indicador. ION ofrece una solución inhibidora 100X ION-Pro conveniente que se puede usar junto con cualquiera de nuestros indicadores fluorescentes sensibles a Tl⁺.
Explore nuestra línea de indicadores y ensayos de talio. Be Brilliant!
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Un ensayo de canal de potasio, y mucho más. El ensayo de flujo de talio (Tl⁺) de alto rendimiento y sin lavado de ION es una solución óptima para medir la actividad del potasio (K⁺), el sodio (Na⁺) y los canales catiónicos no selectivos y sus efectores, incluidos los transportadores y los GPCR. Nuestro kit Express también se puede personalizar para sus necesidades de detección, lo que reduce el desperdicio, aumenta la reproducibilidad y maximiza la comodidad. 100 placas.
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490/515
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Un ensayo de canal de potasio, y mucho más. El ensayo de flujo de talio (Tl⁺) de alto rendimiento y sin lavado de ION es una solución óptima para medir la actividad de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y canales de cationes no selectivos, transportadores y sus efectores, como los GPCR. 10 placas.
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Un ensayo de canal de potasio, y mucho más. Brilliant Thallium Gold incluye Thallos Gold, el indicador de talio (Tl+) fluorescente dorado (Ex/Em = 528/552 nm) de ION. La excitación y la emisión desplazadas al rojo permiten la multiplexación con células que expresan GFP u otros indicadores fluorescentes verdes. Útil para ensayos de canales de potasio (K+) basados en fluorescencia y para estudiar una amplia variedad de canales de cationes monovalentes (canales de sodio), transportadores y GPCR.
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530/550
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Brilliant Thallium Gold Snapshot es una solución de ensayo compatible con varios instrumentos para mediciones de alto rendimiento basadas en placas de pocillos del flujo de talio a través de canales de potasio, sodio y cationes no selectivos, así como algunos transportadores de Na+ o K+. Nuestra tecnología Snapshot pendiente de patente genera una señal de larga duración para que pueda detectar y cuantificar fácilmente los cambios en el canal iónico o la actividad del transportador en la mayoría de los instrumentos con capacidad de fluorescencia. La inclusión de Thallos Gold AM, nuestro indicador de talio desplazado hacia el rojo, convierte a este kit en la opción ideal cuando se utilizan células que expresan GFP para realizar ensayos de canales de potasio.
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Un ensayo de canal de potasio compatible con el punto final. El kit Brilliant Thallium Snapshot de ION es una adaptación de ensayo de flujo de talio diseñada para trabajar con lectores de placas estándar, microscopios, citómetros de flujo y más, para medir el flujo a través de canales de potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y cationes no selectivos, transportadores y sus efectores, incluidos los GPCR.
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El ensayo de canal de potasio por citometría de flujo de ION Biosciences es la primera solución de ensayo para mediciones unicelulares de alto rendimiento de la actividad del canal de potasio. Impulsada por nuestra tecnología de ensayo Snapshot pendiente de patente, la modulación del canal iónico genera una señal de larga duración para que pueda detectar y cuantificar fácilmente los cambios en el canal iónico o la actividad del transportador mediante la citometría de flujo. Este kit también puede funcionar para canales de sodio, canales de cationes no selectivos y algunos transportadores de Na+ o K+. 200 ensayos.
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El mejor de su clase, fluorescente verde, indicador de talio (Tl⁺), permeable a la membrana. Funciona con potasio (K⁺), sodio (Na⁺) y canales de cationes monovalentes y transportadores.
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Thallos Gold es un indicador intracelular de talio (Tl+) fluorescente dorado (Ex/Em = 528/552 nm). La excitación y la emisión desplazadas al rojo permiten la multiplexación con células que expresan GFP u otros indicadores fluorescentes verdes. Útil para ensayos de canales de potasio basados en fluorescencia y para estudiar una amplia variedad de canales de cationes monovalentes (canales de sodio), transportadores y GPCR.
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