Descripción
Cada proteína de membrana tiene su propio entorno lipídico nativo. Por lo tanto, cada entorno lipídico es único para cada proteína de membrana. Y es este entorno lipídico con el que interactúan los polímeros sintéticos como los AASTY. Por lo tanto, se necesita una selección más amplia de polímeros, ya que no hay un AASTY que se ajuste a cada composición de fosfolípidos.
Para abordar esta pregunta, los AASTY vienen en tres proporciones diferentes de ácido acrílico a estireno. Las proporciones difieren en la propiedad hidrofílica de AASTY, lo que da como resultado diferentes afinidades para variar las composiciones de lípidos de la membrana. La segunda característica a evaluar cuando se trata de AASTY es el tamaño de los nanodiscos resultantes. Una de las mejores características de AASTY en comparación con SMA o DIBMA es que sus nanodiscos tienen un tamaño bastante uniforme. Por lo tanto, el tamaño de nanodisco de ajuste correcto debe determinarse antes.
Catalogo | Producto | Presentación |
---|---|---|
CU-18285 | AASTY Screening Kit | 6 x 2 x 50 mg |
Caracteristicas
AASTY 6-45 | AASTY 11-45 | AASTY 6-50 | AASTY 11-50 | AASTY 6-55 | AASTY 11-55 | |
---|---|---|---|---|---|---|
Molecular Weight | 5-6 kDa | 10-11 kDa | 5-6 kDa | 10-11 kDa | 5-6 kDa | 10-11 kDa |
pH after solving | 7.5 | 7.5 | 7.5 | 7.5 | 7.5 | 7.5 |
Divalent cationic tolerance | 6 mM | 6 mM | 6 mM | 6 mM | 6 mM | 6 mM |
Acrylic Acid : Styrene Ratio | 45% to 55% | 45% to 55% | 50% to 50% | 50% to 50% | 55% to 45% | 55% to 45% |
Envio y Almacenamiento
Este producto se envia a temperatura ambiente. Almacenamiento de copolímero disuelto: a 2-8°C. . Almacenamiento de copolímero liofilizado a tiempo largo: a -20°C.
Resultado de Laboratorio
Dado que cada proteína de membrana, rodeada por su entorno de fosfolípidos característico, se comporta de manera diferente con todos los demás polímeros, por lo general se recomienda buscar las condiciones más viables de la proteína de interés. Sin embargo, cuando esté interesado en condiciones con concentraciones de polímero más bajas, los AASTY son una buena opción para comenzar con sus experimentos.
Fig. 1: Rendimiento de AASTY en comparación con otros polímeros sintéticos. Especialmente a la concentración más baja de 0.5 %, AASTY generalmente funciona mejor que otros polímeros.
VIDEO
Vea nuestro video sobre cómo el nanodisco puede ayudarlo a superar uno de los desafíos más difíciles en las ciencias de las proteínas.
FAQ
– ¿Está el copolimero AASTY de Cube Biotech listo para usar?
R: Sí, AASTY está listo para usar. Puede comenzar directamente con la solubilización. Lee nuestro protocolo para más información.
– ¿Qué pH es adecuado para AASTY?
R: Desde un pH 7 en adelante. AASTY no se solubiliza si el pH es inferior a 6.5. Como los diferentes AASTY que se ofrecen difieren en su composición, es probable que tengan un pH óptimo diferente, dependiendo de la composición de los lípidos que se solubilicen en nanodiscos.
El grado de protonación y, por lo tanto, el equilibrio hidrofílico/hidrofóbico del copolímero difiere en los rangos de pH. La efectividad de AASTY para una proteína determinada se puede optimizar en términos de pH y copolímero utilizado.
Figura 2: El pH del buffer y su efecto sobre la protonación de SMA y AASTY, que se muestra para AASTY con un porcentaje variable de monómero de ácido acrílico.
– ¿Que concentraciones de AASTY debo usar mi proteína?
R: Debe analizar la proporción de polímero a proteína ya que es dependiente de sistema.
– Usé AASTY para la solubilización de proteínas y apareció un precipitado blanco. ¿Qué pasó?
AASTY probablemente se precipito. Debe verificar el pH y asegurarse de que nunca baje de 7.0.
-¿Cómo cuantifico la cantidad de proteína después del tratamiento con AASTY?
R: AASTY absorbe luz a 280 nm de forma similar a las proteínas debido a los restos de estireno. Por lo tanto, la absorción UV no es una opción aquí. Los componentes en los ensayos de ácido bicinconínico (BCA) probablemente estén influenciados por AASYY. Sin embargo, el ensayo Bradford y SDS-PAGE funcionan.
Descargo de responsabilidad:
El uso de productos de copolímero de anhídrido acrílico de estireno (AASTY) para la fabricación de ácido acrílico de estireno copolímero – partículas lipídicas (nanodiscos), y el uso de AASTY, están cubiertos por una o más de las siguientes patentes solicitudes: solicitud de patente de EE. UU., número de serie 62/864,696, presentada el 21 de junio de 2019 y solicitud PCT PCT/US2020/038714 presentado el 19 de junio de 2020.
El comprador tiene licencia bajo esas patentes para usar AASTY; para la fabricación de partículas lipídicas y utilizar AASTY así fabricado con fines de investigación y desarrollo de proteínas, incluidos sus producción (incluida la purificación y la solubilización), cribado, ensayo, análisis, caracterización (incluida la análisis estructural y caracterización), incluso con fines de detección de drogas, pero no con fines de administración de agentes a humanos u otros animales con fines terapéuticos, de diagnóstico o profilácticos, que utiliza están específicamente prohibidos.
También te puede gustar: | Proteínas |