AASTY 6-45

Descripción

Los AASTY (ácido acrílico-coestirenos), como AASTY 6-45, son copolímeros altamente alternantes, muy adecuados para la generación de nanodiscos de lípidos nativos. Son una nueva serie desarrollada en 2022 para la solubilización y estabilización de proteínas de membrana. AASTY 6-45 recibe su nombre por su peso molecular y la relación ácido acrílico: estireno. Estas proporciones variables de ácido acrílico a estireno contribuyen a las propiedades hidrofílicas de nuestros AASTY. En general, los AASTY más ligeros, como el 6-45, tienden a ser más agresivos, mientras que los AASTY más pesados, como el 11-45, muestran una mayor estabilidad termodinámica.

La composición exacta de los copolímeros AASTY muestra una eficiencia de extracción diferente, dependiendo de la composición lipídica de las bicapas lipídicas que se formulan en nanodiscos. Como AASTY se fabrica mediante técnicas de polimerización radicalaria controlada, la dispersión de la distribución del peso molecular del polímero es baja y los pesos moleculares están controlados. Esto significa que el exceso de copolímero AASTY se puede eliminar mediante diálisis después de la formación del nanodisco. Con base en hallazgos previos sobre SMA, se espera que AASTY de diferentes pesos moleculares muestre diferentes tasas de formación de nanodiscos, eficacia de extracción y estabilidad de los nanodiscos resultantes.

Cada solubilización de proteínas de membrana debe someterse a un proceso de selección antes. El entorno de fosfolípidos característico que rodea a las diferentes proteínas de membrana en cuestión se comporta de manera diferente con cada polímero. Para ayudarlo en este proceso, ofrecemos un práctico kit de detección para AASTY para probarlos todos.

Recomendamos las dos publicaciones siguientes si desea obtener más información: Smith et al. 2020 y Timcenko et al. 2022

Catalogo	Producto	Presentación
CU-18250	AASTY 6-45	10 x 50 mg
CU-18251	AASTY 6-45	1 g
CU-18252	AASTY 6-45	10 x 1g

Caracteristicas

State	Lyophilized Powder, to be solved with water
Molecular Weight	5-6 kDa
Buffer	HEPES
pH after solving	7.5
Divalent cationic tolerance	6 mM
Acrylic Acid to Styrene Ratio	45% to 55%
Storage	4°C for long-term
Structure

Envio y Almacenamiento

Este producto se envia a temperatura ambiente. Almacenamiento de copolímero disuelto: a 2-8°C. . Almacenamiento de copolímero liofilizado a tiempo largo: a -20°C.

Resultado de Laboratorio

Dado que cada proteína de membrana, rodeada por su entorno de fosfolípidos característico, se comporta de manera diferente con todos los demás polímeros, por lo general se recomienda buscar las condiciones más viables de la proteína de interés. Sin embargo, cuando esté interesado en condiciones con concentraciones de polímero más bajas, los AASTY son una buena opción para comenzar con sus experimentos.

Fig. 1: Rendimiento de AASTY en comparación con otros polímeros sintéticos. Especialmente a la concentración más baja de 0.5 %, AASTY generalmente funciona mejor que otros polímeros.

VIDEO

Vea nuestro video sobre cómo el nanodisco puede ayudarlo a superar uno de los desafíos más difíciles en las ciencias de las proteínas.

FAQ

– ¿Está el copolimero AASTY de Cube Biotech listo para usar?

R: Sí, AASTY está listo para usar. Puede comenzar directamente con la solubilización. Lee nuestro protocolo para más información.

– ¿Qué pH es adecuado para AASTY?

R: Desde un pH 7 en adelante. AASTY no se solubiliza si el pH es inferior a 6.5. Como los diferentes AASTY que se ofrecen difieren en su composición, es probable que tengan un pH óptimo diferente, dependiendo de la composición de los lípidos que se solubilicen en nanodiscos.

El grado de protonación y, por lo tanto, el equilibrio hidrofílico/hidrofóbico del copolímero difiere en los rangos de pH. La efectividad de AASTY para una proteína determinada se puede optimizar en términos de pH y copolímero utilizado.

Figura 2: El pH del buffer y su efecto sobre la protonación de SMA y AASTY, que se muestra para AASTY con un porcentaje variable de monómero de ácido acrílico.

– ¿Que concentraciones de AASTY debo usar mi proteína?

R: Debe analizar la proporción de polímero a proteína ya que es dependiente de sistema.

– Usé AASTY para la solubilización de proteínas y apareció un precipitado blanco. ¿Qué pasó?

AASTY probablemente se precipito. Debe verificar el pH y asegurarse de que nunca baje de 7.0.

-¿Cómo cuantifico la cantidad de proteína después del tratamiento con AASTY?

R: AASTY absorbe luz a 280 nm de forma similar a las proteínas debido a los restos de estireno. Por lo tanto, la absorción UV no es una opción aquí. Los componentes en los ensayos de ácido bicinconínico (BCA) probablemente estén influenciados por AASYY. Sin embargo, el ensayo Bradford y SDS-PAGE funcionan.

Descargo de responsabilidad:

El uso de productos de copolímero de anhídrido acrílico de estireno (AASTY) para la fabricación de ácido acrílico de estireno copolímero – partículas lipídicas (nanodiscos), y el uso de AASTY, están cubiertos por una o más de las siguientes patentes solicitudes: solicitud de patente de EE. UU., número de serie 62/864,696, presentada el 21 de junio de 2019 y solicitud PCT PCT/US2020/038714 presentado el 19 de junio de 2020.
El comprador tiene licencia bajo esas patentes para usar AASTY; para la fabricación de partículas lipídicas y utilizar AASTY así fabricado con fines de investigación y desarrollo de proteínas, incluidos sus producción (incluida la purificación y la solubilización), cribado, ensayo, análisis, caracterización (incluida la análisis estructural y caracterización), incluso con fines de detección de drogas, pero no con fines de administración de agentes a humanos u otros animales con fines terapéuticos, de diagnóstico o profilácticos, que utiliza están específicamente prohibidos.