Descripción
Las proteínas del andamiaje de membrana derivan de la apolipoproteína (apo; A-I). Se utilizan en las ciencias de las proteínas de membrana para estabilizar las proteínas de membrana en un entorno lipídico después de la eliminación de la membrana celular. El tamaño del nanodisco está determinado por el MSP que se utilizó para crear el disco. MSP1D1 crea nanodiscos de ~9-10 nm de diámetro.
Este producto es un kit de ensamblaje de nanodiscos MSP. Contiene un vial de proteína de estructura de membrana liofilizada MSP1D1 y un vial de fosfolípido de DMPC o POPC para ensamblar un nanodisco de MSP.
Con este kit de montaje, tanto las proteínas expresadas en células como las libres de células se pueden estabilizar en nanodiscos de MSP. Simplemente use el protocolo correspondiente para cada propósito (ver más abajo).
Figura 1: Esquema de un nanodisco MSP. Una proteína de estructura de membrana (MSP, verde) forma una estructura en forma de disco con algunos fosfolípidos.
Catalogo | Producto | Presentación |
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CU-26231 | Nanodisc Assembly Kit MSP1D1 DMPC | Kit |
Caracteristicas
MSP PROTEIN | |
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Origin of MS Protein | Human |
Purity | > 90% (Determined by SDS-PAGE) |
Number of amino acids | 201 (Human origin)198 (Mouse origin) |
Molecular Mass | 23,329 Da (Human origin)22.948 Da (Mouse origin) |
Extinction coefficient (in water) ε280 | 25,440 M-1cm-1 (Human origin)20,970 M-1cm-1 (Mouse origin) |
Buffer | 20 mM TRIS pH 7.4; 100 mM NaCl; 0.5 mM EDTA |
Sequence (Human origin), for the other origins please send request | GLKLLDNWDSVTSTFSKLREQLG PVTQEFWDNLE KETEGLRQEMS KDLEEVKAKVQ PYLDDFQKKWQEEMELYRQKVE PLRAELQEGARQKLHELQEKLS PLGEEMRDRARAHVDALRTHLA PYSDELRQRLAARLEALKENGG ARLAEYHAKATEHLSTLSEKAK PALEDLRQGLL PVLESFK VSFLSALEEY TKKLNTQ |
Affinity tag | none |
Shipping Temperature | Room Temperature |
Storage of lyophilized protein | -20°C for several months |
Storage of reconstituted protein | 2-8°C for several days |
Referencias | 1. Bayburt, T.H. et al. Reconstitution and imaging of a membrane protein in a nanometer-size phospholipid bilayer. J. Struct. Biol. (1998), 123(1):37-44 2. Civjan, N.R. et al. Direct solubilization of heterologously expressed membrane proteins by incorporation into nanoscale lipid bilayers. BioTechniques (2003) 35:556-563 3. Hagn, F. et al. Optimized phospholipid bilayer nanodiscs facilitate high-resolution structure determination of membrane proteins. J.Am.Chem. Soc. (2013), 135:1919-1925 4. Proverbio D., et al. Functional properties of cell-free expressed human endothelin A and endothelin B receptors in artifical membrane environments. Biochim.Biophys. Acta (2013), 1828(9):2182-92 5. Roos, C., et al. 2014, High-level Cell-free production of membrane proteins with Nanodiscs. In: Alexandrov, K., and Johnston W.A. (eds) Cell-free protein synthesis: Methods and Protocols. Methods in Molecular Biology, vol. 1118, Springer Science+Business Media. |
PHOSPHOLIPIDS | |
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CAS-Number | DMPC: 18194-24-6POPC: 26853-31-6 |
Molecular Mass | DMPC: 677.93 DaPOPC: 760.08 Da |
Chemical Formula | DMPC: C36H72NO8PPOPC: C42H82NO8P |
Envio y Almacenamiento
Este producto se envia a temperatura ambiente. Almacenamiento de copolímero disuelto: a 2-8°C. . Almacenamiento de copolímero liofilizado a tiempo largo: a -20°C.
VIDEO
Vea nuestro video tutorial sobre la creación de nanodiscos MSP. Explica todo el proceso, comenzando por la solubilización inicial con detergentes. La proteína que se estabilizó en esta demostración fue la bacteriorrodopsina.
También recomendamos nuestro video guía sobre nanodiscos en general.
FAQ
– ¿Es este el producto MSP correcto para mi proteína de membrana?
R: Esto no se puede responder fácilmente ya que cada proteína de membrana se comporta de manera diferente con cada tamaño de nanodisco y fosfolípido. Suele requerir un proceso de selección previo. Recuerde que las proteínas de membrana con menos dominios transmembrana (TMD) requieren un nanodisco más pequeño, mientras que una gran cantidad de TMD necesitan un nanodisco más grande.
– ¿Puedo acortar el protocolo de estabilización Cell-Free?
R: En cierto sentido. Tambien puede utilizar nuestros nanodiscos MSP ya preensamblados para omitir el ensamblaje del nanodisco, que requiere mucho tiempo.
– Los nanodiscos de MSP requieren solubilización con detergentes antes. ¿También ofrecen estos?
R: Si ofrecemos detergentes. Los productos los encontrará Aqui.
– Nunca antes había trabajado con nanodiscos MSP. ¿Puedes informarme más sobre ellos?
R: ¡Por supuesto! De hecho, creamos esta GUÍA DE NANODISCO MSP con este fin. Favor de visitar.
– ¿Existen otras opciones para estabilizar las proteínas de membrana además de los nanodiscos MSP?
R: Sí hay otra opción. Recomendamos los nanodiscos de copolímero sintético. Favor de visitar esta siguiente pagina GUÍA para obtener más información.
Descargo de responsabilidad:
Nuestros productos están destinados para investigación en aplicaciones de biología molecular. Estos productos no están destinados al diagnóstico, prevención o tratamiento de una enfermedad. Los nanodiscos están protegidos por las patentes estadounidenses 7.691.414; 7.662.410; 7.622.437; 7.592.008; 7.575.763; 7.083.958; 7,048,949
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